Ошибки при определении группы крови,
Rh принадлежности и проведении проб на
индивидуальную совместимость возникают
при нарушении техники выполнения
исследования или в случаях трудноопределимых
групп крови.
5.1. Технические ошибки.
5.1.1. Ошибочный порядок расположения
реагентов. При правильной оценке
результата в каждом отдельно взятом
реагенте можно сделать неправильное
заключение о группе крови и резус —
принадлежности, если нарушен порядок
расположения реагентов в штативе или
на пластинке. Поэтому каждый раз при
определении группы крови следует
проверить расположение реагентов, а
также визуально оценить их качество,
исключить использование помутневших,
частично высохших реагентов, реагентов
с истекшим сроком годности.
5.1.2. Температурные условия. Определение
группы крови производят при температуре
не ниже 15 град. С,поскольку исследуемая
кровь может содержать поливалентные
холодовые агглютинины, вызывающие
неспецифическое склеивание эритроцитов
при пониженной температуре. Видимость
агглютинации может создавать образование
«монетных столбиков». Неспецифическая
агрегация эритроцитов, как правило,
распадается после добавления 1-2 капель
физиологического раствора и покачивания
пластинки.
При повышенной температуре анти-А,
анти-В, анти-АВ антитела утрачивают
активность, поэтому определение группы
крови производят при температуре не
выше 25 град. С.
5.1.3. Соотношение реагентов и исследуемых
эритроцитов.
Оптимальное для реакции агглютинации
соотношение эритроцитов и тестовых
реагентов — 1:10 при использовании
гемагглютинирующих сывороток, 2-3:10 при
использовании моноклональных реагентов
(цоликлонов) и реагентов, приготовленных
в комбинации с коллоидами.
При значительном избытке эритроцитов
агглютинация может быть не замечена,
особенно в тех случаях, когда
агглютинационные свойства эритроцитов
снижены — подгруппа A2. При недостаточном
количестве эритроцитов агглютинация
медленно появляется, что также может
привести к неправильной трактовке
результатов в случае исследования
эритроцитов со слабой агглютинабельностью.
5.1.4. Продолжительность наблюдения.
Агглютинация эритроцитов появляется
в течение первых 10 с., однако наблюдение
за ходом реакции следует проводить не
менее 5 мин., особенно внимательно
наблюдая те капли, в которых агглютинация
не появилась. Это позволяет выявить
слабый агглютиноген А2, характеризующийся
замедленной агглютинацией.
5.2. Трудноопределимые группы крови.
5.2.1. Подгруппы крови. Антиген А,
содержащийся в эритроцитах группы А(II)
и AB(IV), может быть представлен двумя
вариантами (подгруппами) — А1 и А2. Антиген
В таких различий не имеет. Эритроциты
A2 отличаются от эритроцитов A1 низкой
агглютинационной способностью по
отношению к антителам анти-А. Подгруппы
крови в клинической трансфузиологии
значения не имеют, поэтому при переливании
эритроцитов их не учитывают. Лицам,
имеющим антиген А2, можно переливать
эритроциты А1; лицам, имеющим антиген
А1, можно переливать эритроциты А2.
Исключение составляют реципиенты,
имеющие экстраагглютинины альфа1 и
альфа2. Эти антитела не вызывают
посттрансфузионных осложнений, однако
проявляют себя в пробе на индивидуальную
совместимость. В частности, сыворотка
реципиента А2альфа1 агглютинирует
эритроциты А1 на плоскости или в пробирках
при комнатной температуре, поэтому
реципиентам A2альфа1(II) переливают
эритроциты 0(I), реципиентам A2Вальфа1(IV)
переливают эритроциты В(III) или 0(I).
5.2.2. Неспецифическая агглютинация
эритроцитов. О ней судят на основании
способности эритроцитов агглютинироваться
сыворотками всех групп, включая AB(IV).
Неспецифическая агглютинация наблюдается
при аутоиммунной гемолитической анемии
и других аутоиммунных заболеваниях,
сопровождающихся адсорбцией аутоантител
на эритроцитах, при гемолитической
болезни новорожденных, эритроциты
которых нагружены аллоантителами
матери.
Неспецифическую агглютинацию трудно
отличить от специфической. Поэтому при
наличии агглютинации эритроцитов с
реагентами анти-А, анти-В, анти-АВ, анти-D
необходимо провести пробу со стандартной
сывороткой AB(IV) и физиологическим
раствором. В противном случае реципиент
может быть ошибочно отнесен к группе
AB(IV) резус положительный, что повлечет
за собой неправильный выбор донора.
Если из-за неспецифической агглютинации
эритроцитов группу крови больного
установить не удается, заключение о
групповой принадлежности крови не
выдают, образец крови направляют в
специализированную лабораторию. При
наличии жизненных показаний больному
переливают эритроциты группы 0(I).
5.2.3. Кровяные химеры. Кровяными химерами
называют одновременное пребывание в
кровяном русле двух популяций эритроцитов,
отличающихся по группе крови и другим
антигенам. Трансфузионные химеры
возникают в результате многократного
переливания эритроцитной массы или
взвеси группы 0(I) реципиентам другой
группы. Истинные химеры встречаются у
гетерозиготных близнецов, а также после
пересадки аллогенного костного мозга.
Установление группы крови при кровяных
химерах затруднено, поскольку в некоторых
случаях половина эритроцитов, циркулирующих
в кровяном русле, имеет одну группу
крови, а другая половина — другую.
Реципиенту, имеющему кровяную химеру,
переливают эритроцитную массу или
взвесь, не содержащие антигены, по
отношению к которым у реципиента могут
быть антитела.
5.2.4. Другие особенности. Определение
группы крови АВ0 и резус — принадлежности
может быть затруднено у больных в связи
с изменением свойств эритроцитов при
различных патологических состояниях.
Это может выразиться в повышенной
агглютинабельности эритроцитов,
наблюдаемой у больных циррозом печени,
при ожогах, сепсисе. Агглютинабельность
может быть столь высока, что эритроциты
склеиваются в собственной сыворотке и
физиологическом растворе. При лейкозах
наблюдается снижение агглютинабельности
эритроцитов, в результате чего значительное
их количество остается не вовлеченным
в агглютинацию даже при использовании
высокоактивных стандартных реагентов
(ложная кровяная химера).
У некоторых новорожденных, в отличие
от взрослых людей, антигены А и В на
эритроцитах выражены слабо, а
соответствующие агглютинины в сыворотке
крови отсутствуют.
Во всех случаях нечеткого, сомнительного
результата необходимо повторить
исследование, используя дополнительно
стандартные реагенты другой серии. Если
результаты остаются неясными, образец
крови направляют на исследование в
специализированную лабораторию.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]
- #
- #
- #
- #
13.05.20153.34 Mб23Osmos.doc
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
Ошибки при определении групп крови
Регистрационные удостоверения
Разновидности ошибок при определении групп крови: технические, вызванные применением некачественных реагентов, обусловленные биологическими особенностями анализируемых образцов.
Технические причины
- Некорректное расположение реагентов на планшете.
- Нарушение количественного отношения цоликлонов и эритроцитов.
- Недостаточная стерильность планшетов и пипеток.
- Неверная запись в историю болезни.
- Несоблюдение времени реакции агглютинации. В случае ожидания менее 5 минут реакция может не наступить при наличии слабых агглютиногенов. При передержанной реакции подсыхание капель с краев может симулировать ложноположительный результат.
- Температура воздуха свыше 25 °C. Рекомендуется использовать специальные реагенты с поправкой на температурные условия, опускать внешнюю часть планшета в холодную воду.
- Недостаточное или избыточное центрифугирование. В первом случае возможны ложноположительные результаты, во втором – ложноотрицательные.
Низкое качество реагентов
- Титр цоликлонов менее 1:32, использование просроченных реагентов вызывают позднюю или слабо выраженную реакцию.
- Загрязнение и недостаточная консервация цоликлонов и стандартных эритроцитов вызывает «бактериальную» агглютинацию.
Биологические особенности эритроцитов
- Слабые формы антигенов эритроцитов вызывают позднюю и слабо выраженную агглютинацию. Во избежание ошибок определения групп крови осуществляют повторное исследование с другой серией цоликлонов и увеличенным временем реакции, применяют моноклональные антитела Анти-Aсл., проводят типирование перекрестным способом со стандартными эритроцитами.
- «Панагглютинация» вызывает неспецифическую агглютинацию со всеми сыворотками. Онкологические и гематологические пациенты попадают в группу риска. Для устранения «аутоагглютинации» используют трехкратное отмывание эритроцитов. Планшет прогревают в течение 5 минут в термостате при 37 °C. В ряде случаев предварительно подогревают пробирку, реактивы, раствор NaCl.
- «Монетные столбики» эритроцитов. По окончании исследования в поле реакции рекомендуется добавить 1 – 2 капли 0,9 % раствора NaCl и покачать планшет.
- Неполная агглютинация. Частичная агглютинация эритроцитов может возникать после пересадки пациенту костного мозга или в первые месяцы после трансфузии крови 0(I). Для окончательного типирования антигенов по системам AB0 и Резус рекомендуется использование ID-гелевых карт.
Биологические особенности антител
- Выявление иммунных антител, возникших в результате предшествующей сенсибилизации. Больному с иммунными антителами требуется индивидуальный подбор донора.
- Возникновение «монетных столбиков». Сомнительный результат подтверждают со стандартными эритроцитами 0(I). Для распознавания истинной агглютинации добавляют изотонический раствор и покачивают планшет.
- Отсутствие Анти-A и Анти-B-антител. Встречается у младенцев и больных с угнетением гуморального иммунитета.
- Присутствие в сыворотке специфических и неспецифических холодовых антител. В случае наличия неспецифических агглютининов агглютинация пропадает во время проведения исследования при 37 °C. Взаимодействие сыворотки со стандартными эритроцитами 0(I) говорит о присутствии специфических холодовых антител. Специфичность антител определяется с помощью типированных по системам P и MNS эритроцитов.
Список литературы
- Рагимов, А.А. Трансфузионная иммунология/А.А. Рагимов, Н.Г. Дашкова. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — 279 с.
- Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови/Ю.Л. Шевченко, Е.Б. Жибурт. — СПб.: Питер, 2000. — 308 с.
Патенты
Галерея 1
Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов
Регистрационное удостоверение на медицинское изделие. ТУ 22.29.29−001−06125010−2017. № РЗН 2018/6730 от 02 марта 2020 года
Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов
Приложение к регистрационному удостоверению на медицинское изделие. ТУ 22.29.29−001−06125010−2017. № РЗН 2018/6730 от 02 марта 2020 года
Набор реагентов для изосерологических исследований in vitro (Иммуногем-Сангвитест)
Регистрационное удостоверение на медицинское изделие. ТУ 21.20.23-002-06125010-2018. № РЗН 2019/8361 от 02 марта 2020 года
Набор реагентов для изосерологических исследований in vitro (Иммуногем-Сангвитест)
Приложение к регистрационному удостоверению на медицинское изделие. ТУ 21.20.23-002-06125010-2018. № РЗН 2019/8361 от 02 марта 2020 года
Галерея 2
Патент на промышленный образец 105908
Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Патентообладатель, автор: Чмелев Вадим Мстиславович, генеральный директор ООО
Патент на промышленный образец 109688
Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Патентообладатель, автор: Чмелев Вадим Мстиславович
Патент на промышленный образец 109689
Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Патентообладатель, автор: Чмелев Вадим Мстиславович
Библиографическое описание:
Тактаева, Е. В. Группа крови человека и проблемы при ее определении / Е. В. Тактаева. — Текст : непосредственный // Молодой ученый. — 2019. — № 2 (240). — С. 64-66. — URL: https://moluch.ru/archive/240/55598/ (дата обращения: 12.02.2023).
Группа крови — это генетически наследуемые признаки, не меняются в течение жизни в естественных условиях и описание индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов, которые определяют с помощью методов идентификации специфических групп углеводов и белков, помещенных в мембраны эритроцитов человека или животного. Группа крови также характеризует системы эритроцитарных антигенов, или агглютиногенов (веществ, которые организм человека рассматривает как чужеродные, потенциально опасные, против которых начинает производить собственные антитела, см. агглютиноген), которые контролируются определенными локусами (конкретный участок в хромосоме), содержащие различное количество аллельных (варианты последовательности нуклеотидов ДНК в локусе) генов, таких, например., как A, B и 0 системе AB0. Наличие у людей разных Группа крови обусловлена генетическими факторами, которые содержатся в длинном плече 9-й хромосомы.
К началу 20-го века никто и не подозревал, что кровь может быть разной. Переворот в этой области знаний сделал австрийский врач Карл Ландштейнер, который обнаружил и исследовал три антигены А, В и С. В 1901 году он поставил необычный эксперимент: он принимал сыворотки крови одних людей и смешивал с эритроцитами других, а именно взяв кровь себе и пяти своих сотрудников, отделив сыворотку от эритроцитов с помощью центрифуги и смешал отдельные образцы эритроцитов с сывороткой крови разных лиц и собственной. Некоторые сыворотки склеивали эритроциты, а некоторые — нет. И в зависимости от наличия или отсутствия этой реакции (агглютинации) были обнаружены группы крови.
В совместной работе с Л. Янским по наличию или отсутствию агглютинации Ландштейнер разделил все образцы крови на три группы: А, В и 0. Два года спустя ученики Ландштейнера, А. Штурли и А. Декастелло, открыли четвертую группу крови — АВ. Общепринятым является буквенно-цифровое обозначение Группы крови: первая — 0 (I), вторая группа — А (II), третья группа — В (iii), четвертая группа — АВ (IV). В среднеевропейской популяции по системе AB0 около 43 % людей имеют первую группу крови, 42 % — вторую, 11 % — третьего и около 4 % — четвертую. Группа крови по системе АВ0 отличают по наличию антигенов (агглютиногенов) на эритроцитах и антител (агглютининов) в сыворотке крови (табл. 1).
Эритроцит может обладать только антигеном А (II группа крови), только антигеном В (III группы крови) или и А, и В одновременно (IV группа крови). Если же на поверхности эритроцитов нет ни одного из этих антигенов, значит, он относится к клеткам I (0) группы крови.
Кровь всегда готова к тому, что у нее могут попасть посторонние эритроциты. Если у человека есть антиген А (II группа крови), то в плазме обязательно присутствуют антитела бета. Как только в организм попадает эритроцит, что несет на себе антиген В, антитела тут же прилепятся чужака, как метка. Это передаст иммунной системе сигнал об опасности. У обладателей антигена В (III группы крови) функцию антитела играют альфа распознают эритроциты с А-антигеном.
Таблица 1
Основные факторы, обусловливающие групповую принадлежность крови по системе АВ0
Группа крови |
Антигены (агглютиногены) |
Антитела (агглютинины) |
І |
0 |
α та β |
ІІ |
А |
β |
ІІІ |
В |
α |
ІV |
АВ |
Отсутствуют |
Антигены системы АВО развиваются на эритроцитах еще до рождения ребенка. Например, антиген А находится на эритроцитах 37 дневного плода. Но полное развитие антиген получает после рождения, через несколько месяцев. У взрослых людей кроме антигенов А, В еще имеется антиген Н. Он предшественник антигенов А, В, но может быть и на поверхности эритроцитов первой группы.
В 1911 г обнаружены две подгруппы антигена А, а именно А1 и А2. Между собой они могут отличаться как качественно, так и количественно. Качественно — это особенности в биохимической структуре сахаров. А количественно — это большее количество детерминант в антигене А1. Поэтому факту определены подгруппы А2 и А2В.
Распознать А2 подгруппу можно по сильной активности взаимодействия анти-Н с А2 клетками чем с А1.
Для клинической практики наибольшее значение имеют две классификации Группа крови человека: система AB0 и резус-система (Rhesus) — вследствие того, что эти системы обладают наибольшей антигенной силой. При каждом переливании крови от человека к человеку обязательно учитывают совместимость именно с этими двумя системами, поскольку в случае переливания человеку другой (несовместимой) группы крови происходит агглютинация (склеивание) и гемолиз (разрушение) эритроцитов, что может привести смерти.
Наследование различных групп крови АВО-системы определяется различным сочетанием трех аллелей одной аллеломорфных группы генов, которые обозначаются как JA, β и I ‘и расположены в девять паре хромосом.
Аллель JA определяет образование антигена А на поверхности эритроцитов и агглютинина β в плазме крови, аллель JB — образование антигена В на эритроцитах и агглютинина α в плазме и, в конце концов, за аллеля J отсутствуют антигены А, В на поверхности эритроцитов и содержатся агглютинины α и β в плазме.
Генетические исследования показали, что в этой системе существуют следующие соотношения между генотипом и его фенотипическим проявлением:
‒ генотипы JAJA и JAJ0 дают одинаковый фенотип А с антигеном А и агглютининов β;
‒ генотипы JBJB и JBJ ° обусловливают одинаковый фенотип В с антигеном В и агглютининов α;
‒ генотип JAJB определяет фенотип АВ с антигенами А и В, но без агглютининов α и β;
‒ генотип J ° J ° вызывает фенотип 0 без антигенов А и В, но с агглютининами α и β.
Гены JA и JB в отношении гена J ° ведут себя доминантно.
Группы крови человека можно определить стандартными эритроцитами, цоликлонами (моноклональные антитела) как на плоскости, так и гелевыми технологиями. При определении могут возникнуть ошибки. Технические (например, неправильная маркировка крови и реагентов, неправильное соотношение, срок годности и т. д.), невысокое качество реактивов. Но самое важное это ошибки, обусловленные индивидуальными особенностями антигенов эритроцитов АВО. Поскольку антигены имеют сложную химическую структуру — гликолипиды, гликопротеины, гликозидные остатки, прикрепленные к олигосахаридным цепочкам. Даже сами олигосахаридные цепочки различны у антигенов А и В. Поэтому важно применять широкий спектр антител для определения антигенов. Количество детерминант на эритроцитах различное. При большом их количестве реакция агглютинации сильнее. Окружающая среда может влиять на модификацию антигенов. Детерминанты ослабевают или утрачиваются у онкологически больных людей, лейкозами. Эти изменения мало изучены. Они играют роль в нарушении синтеза трансфераз, ответственных за формирование антигенных детерминант А и В. Так же изменения имеют место при вирусной и бактериальной природе. При таких случаях возможно приобретение, например, В -подобного антигена. Он образуется вследствие влияния микроорганизмов взамен антигена А на мембране эритроцитов. Микроорганизмы выделяют ацетилазы, которые воздействуют на антиген А и последний становится похожим на антиген В. И что интересно, приобретенный антиген В не агглютинирует собственными анти-В антителами. Часто ошибки происходят при не выявлении антигена А2 в группе крови А или в группе крови А2В. Существуют ошибки, связанные со специфической и неспецифической агглютинацией. Это может связано наличием аутоантител как на эритроцитах, так и в сыворотке аллоантител.
Литература:
- Лавряшина М. Б., Толочко Т. А., Волков А. Н. Аллоантигены крови человека: Учеб. пособ. — Кемерово, 2006; Практическая трансфузиология / Под ред. Г. И. Козинке. — М., 2005.
- Википедия — статья «Группа крови».
- Минеева Н. В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. Санкт-Петербург 2010 г. Издание 2-е.
Основные термины (генерируются автоматически): группа крови, антиген А, эритроцит, III, поверхность эритроцитов, агглютинин, антиген, антиген В, система, сыворотка крови.
Каждому человеку полезно запомнить свою группу крови. Это может неожиданно пригодиться при чрезвычайных ситуациях. Не зря у военнослужащих отмечается группа крови на гимнастерке или жетонах. Проблемы с тем, как определить группу крови, не существует. В крупных лечебных учреждениях этим занимаются лаборатории. Но даже в небольших сельских амбулаториях имеются стандартные наборы для определения группы, а провести анализ умеют все врачи и средние медицинские работники. Самостоятельно делать это ни к чему, когда есть специалисты.
Какая группа крови у ребенка можно предположить по родителям. Например, зная, что у родителей вторая, третья или четвертая, не стоит надеяться, что у ребенка будет первая.
Главный редактор, заведующий хирургическим отделением
Задать вопрос
Врач-хирург высшей квалификационной категории, доктор медицинских наук, профессор кафедры общей хирургии АГМУ.
Содержание
- Советы для домашнего определения
- Кто придумал группы крови
- Стандартное определение группы крови (простой метод)
- Расшифровка результатов
- Метод перекрестной реакции
- Определение группы цоликлонами
- Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
- Определение группы крови
- Почему важно знать группу крови
- Группы крови и их совместимость
- Когда проводится определение группы крови
- Как сдают анализ на определение группы крови
- Где сдать анализ на определение группы крови в Москве
- Определение группы крови
- Наши врачи
- Определение группы крови и резус-фактора
- Показания к исследованию
- Подготовка к исследованию
- Методы определения группы крови
- Стандартный метод
- Метод перекрестной реакции
- Определение группы крови цоликлонами
- Определение резус-фактора
- Резус-фактор: отрицательный и положительный
- Правила расшифровки результатов
- Как узнать группу крови
- Генетика группы крови и их полиморфизмы
- Группы крови и их полиморфизмы
- Система АВО групп крови
- Система Rh групп крови
- Гемолитическая болезнь новорожденных и группы крови
- Группа крови и резус-фактор
- Для чего определяют группу и резус-фактор крови
- Методика проведения анализа
- Интерпретация полученных результатов
- Диагностическая ценность определения групповой и резусной принадлежности
- Что может повлиять на результат исследования?
- Кто может быть донором, а кто реципиентом?
Советы для домашнего определения
Подобные советы дают люди, которые «живут» в интернете и собирают любую информацию без разбора. Порой переиначивают ее на свой лад.
Действительно, имеется теория питания в зависимости от типа крови и проведены попытки связать с ней характер личности. Но это разрабатывалось для подбора наиболее подходящего рациона, предотвращения болезней. О связи типа личности с номером крови даже психологи перестали говорить.
Тем более, нельзя судить по любимым блюдам или наклонности к лидерству о своей группе.
В домашних условиях что-либо узнать лучше из полноценных статей, консультаций специалистов. Возможно, имеются медицинские документы (амбулаторная карта, выписки из стационара), в которых есть сведения о вашей крови.
По желанию доноров и пациентов стационаров в паспорт можно проставить печать с указанием этих сведений.
Подобные нашивки применяются на армейской форме
Кто придумал группы крови
Первооткрывателем четырех групп крови является австрийский ученый и врач К. Ландштейнер, получивший за это Нобелевскую премию по медицине в 1930 году. Открытие позволило предотвратить смертельные исходы по причине переливания, изучать предварительно совместимость донорских признаков и реципиента.
Суть предложенной системы АВ0 заключается в наличии у человека и животных антигенных структур на эритроцитах. Типовых антител (гаммаглобулинов) к ним в плазме не имеется. Поэтому реакцию «антиген + антитело» можно использовать для определения.
Распространенность групп крови по национальному признаку
Склеивание эритроцитов происходит во время встречи антигена со своим антителом. Такая реакция называется гемагглютинацией. Она видна при проведении анализа в виде мелких хлопьев. Определение группы крови основывается на получении картины агглютинации с типовыми сыворотками.
Антигены эритроцитов типа «А» связываются с антителами «ά», соответственно «В» с «β». По составу крови выделены:
- I, или 0 (ά, β) — на поверхности эритроцитов совсем нет антигенов;
- II, или А (β) — содержат антиген А с антителом β;
- III, или В (ά) — имеется антиген типа В с антителом ά;
- IV, или АВ(00) — имеет оба антигена, но не содержит антител.
Антигены имеются у зародыша человека уже в эмбриональном периоде, а антитела (агглютинины) появляются в сыворотке новорожденных в течение первого месяца жизни.
Стандартное определение группы крови (простой метод)
Для проведения анализа на группу крови нужны эритроциты пациента (берутся из капли крови) и стандартные сыворотки, содержащие известные антигены.
Сыворотки изготавливаются из донорской крови на «Станциях переливания», имеют сроки годности, требуют соблюдения условий хранения. На ампулах указывается номер серии. Для точного анализа берется два набора сывороток разных серий. Это делается с целью исключения ошибок.
На плоской тарелке двумя рядами помещают по крупной капле четырех сывороток (достаточно только III и II, но для контроля берется еще 1 и 1V). Разными стеклянными палочками (удобно пользоваться глазными пипетками) в капли сывороток вносят исследуемую кровь (соотношение должно получиться примерно 1:10) и осторожно помешивают.
Пять минут тарелку покачивают, давая возможность сывороткам хорошо перемешаться с кровью.
Расшифровка результатов
Проходит 5 минут, и можно оценивать результаты анализа. В больших каплях сыворотки наступает просветление, в одних образуются мелкие хлопья (реакция агглютинации), в других их нет. Здесь возможны варианты:
- если агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками III и II групп (+ контрольные 1 и 1V) — это первая группа;
- если свертывание отмечается во всех, кроме II — это указывает на вторую группу;
- при отсутствии агглютинации только с III сывороткой — устанавливается третья группа крови;
- если свертываемость отмечается во всех пробах, включая 1V-контрольную — группа четвертая.
Когда сыворотки расположены в правильном порядке, на тарелке проставлены подписи, то ориентироваться легко: где нет агглютинации, такая и группа.
Бывают случаи, когда склеивание видно неясно. Тогда анализ переделывают, мелкую агглютинацию смотрят под микроскопом.
Метод перекрестной реакции
Для уточнения группы при невыраженной агглютинации применяют метод двойной перекрестной реакции со стандартными эритроцитами. В данном случае известными являются не сыворотки, как в простом методе, а эритроциты. У пациента кровь набирают в пробирку, центрифугируют и для исследования пипеткой откачивают сверху сыворотку.
На плоскую белую тарелку капают 2 большие капли сыворотки от пациента. В них добавляются стандартные эритроциты А (II) и В (III) групп крови. Постепенно размешивают, покачивают тарелку.
Результат оценивается через 5 минут:
- если агглютинация наступила в обеих каплях, группа первая;
- если нет ни в одной пробе, группа четвертая;
- если в одной из примененных известных эритроцитов, то группа определяется по наличию или отсутствию свертываемости в капле.
Определение группы цоликлонами
Цоликлоны — это синтетические заменители сывороток. Они содержат искусственные заменители агглютининов ά и β. Их называют эритротестами «Цоликлон анти-А» (розового цвета) и «анти-В» (синего). Ожидаемая агглютинация происходит между эритроцитами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов.
Методика не требует использования двух серий, считается более точной и надежной. Проведение и оценка результатов такие же, как в простом стандартном методе.
Вид цоликлонов | Группа крови | |
Результат агглютинации | Анти-А | Анти-В |
— | — | 0(I) |
+ | — | A(II) |
— | + | B(III) |
+ | + | AB(IV) |
Особенность: четвертая группа АВ(IV) обязательно подтверждается реакцией агглютинации со специфическим цоликлоном «анти-АВ» и отсутствием неспецифического склеивания эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия.
Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
Метод позволяет определить группу и резус фактор в лаборатории и полевых условиях. В состав набора входит карточка с лунками. На дно лунок уже нанесены высушенные реагенты. Здесь, кроме «анти-А», «анти-В» и «анти-АВ» используется «анти-D», который дает результат резус-фактора.
Можно использовать кровь в любом виде, подойдет соединение с консервантом и взятая из пальца.
Перед исследованием на карточке записывается фамилия пациента, в каждую лунку вносится капля воды для растворения ингредиентов. Затем отдельными палочками в лунки с реактивами добавляют кровь и слегка перемешивают. Окончательный результат «читают» спустя три минуты.
Группа крови всегда перепроверяется при необходимости переливания. Одновременно контролируют групповую и индивидуальную совместимость. Ведь, на самом деле, в крови человека обнаружено гораздо больше антигенных свойств, чем в системе АВ0. Просто они у большинства населения слабо проявляются.
Но у пациента с тяжелыми заболеваниями, изменяющими свойства крови и аллергизирующими организм, они становятся определяющими, требуют считаться с наличием и уровнем в крови. Поэтому знание пациентом собственной группы добавляет уверенности в результате исследования.
Определение группы крови
Определение группы крови – это анализ, с помощью которого выявляется принадлежность человека группе людей с определенными иммуногенетическими характеристиками крови, что позволяет установить их совместимость между собой по этому признаку. Группа крови формируется у ребенка еще в период внутриутробного развития и сохраняется неизменной всю жизнь.
Почему важно знать группу крови
Определение совместимости по группе крови необходимо, прежде всего, для трансфузии (переливания крови). Большая потеря крови смертельно опасна. С давних времен предпринимались попытки возместить кровопотерю за счет вливания крови другого человека. Но первую попавшуюся кровь использовать нельзя. При смешивании крови «вслепую» примерно в половине случаев происходит агглютинация: красные кровяные тельца (эритроциты) начинают склеиваться между собой, образуя скопления. Хлопья, возникающие при агглютинации, видны в пробирке невооруженным глазом; понятно, что если этот процесс случится внутри кровеносной системы, ничего хорошего для человека ждать нельзя.
В начале XX века было установлено, почему происходит агглютинация. На поверхности мембраны эритроцита (красной кровяной клетки) находятся особые белки-антигены (их назвали агглютиногенами). Антигенами они называются потому, что могут связываться с другими веществами – антителами. Связь эта специфична, то есть данный антиген может быть связан только конкретным антителом. Когда мы говорим о группах крови, мы пользуемся системой, которую интересует только два антигена (на самом деле их «ездит» на эритроцитах гораздо больше). Для удобства эти антигены (агглютиногены) обозначены первыми буквами латинского алфавита – A и B. Соответствующие им антитела (их называют агглютининами) обозначены первыми буквами греческого алфавита – α (альфа) и β (бета).
Очевидно, что антиген и соответствующее ему антитело одновременно в крови находиться не могут, иначе пошла бы реакция (агглютинация). А вот другие комбинации возможны. Именно они и определяют, к какой группе принадлежит наша кровь.
Группы крови и их совместимость
В отечественной медицине группы обозначаются цифрой и называются соответственно: первая, вторая, третья, четвертая. За рубежом эту систему называют АВ0 и используют соответствующие обозначения.
Группа I (группа 0) – первая (или нулевая). У людей с кровью этой группы на мембране эритроцитов нет обоих агглютиногенов (A и B), а вот агглютинины α и β в плазме присутствуют.
Группа II (А) – вторая группа. Кровь этой группы содержит агглютиноген A и агглютинин β.
Группа III (B) – третья группа. В крови на эритроцитах присутствует агглютиноген B, в плазме – агглютинин α.
Группа IV (AB) – четвертая группа. На эритроцитах присутствуют оба антигена, а антител в плазме нет.
Переливать цельную кровь можно только тогда, когда кровь и донора и реципиента относится к одной группе. Для переливания также могут использоваться эритроциты (они отделяются от плазмы), в этом случае значение имеют лишь агглютиногены. Эритроциты человека первой группы крови можно переливать всем, так как они не могут привнести антиген и спровоцировать агглютинацию. Поэтому человек с первой группой крови является универсальным донором.
Эритроциты второй группы можно переливать людям, у которых и так уже есть в крови агглютиноген А – то есть со второй и четвертой группой. Соответственно, эритроциты третье й группы можно переливать тем, у кого в крови есть агглютиноген B, это — третья и четвертая группа.
Человек с четвертой группой крови является универсальным реципиентом: ему можно переливать эритроциты от людей с любой группой крови, тогда как его кровь можно использовать для переливания только людям с такой же группой крови.
Когда проводится определение группы крови
Показаниями для определения группы крови являются:
- необходимость переливания крови;
- подготовка к операциям. Любая операция – это риск; при определенных обстоятельствах может возникнуть необходимость возместить кровопотерю, и тогда врачи должны знать, какую кровь для этого можно использовать; . В некоторых случаях возможна несовместимость групп крови матери и ребенка. При конфликте по группе крови ребенок может родиться с гемолитической болезнью новорожденных (гемолитической желтухой). Для определения группы крови ребенка сразу после рождения берут на анализ пуповинную кровь. Но о конфликте по группе крови можно судить и в процессе вынашивания – по уровню антител в крови матери. Риск несовместимости по группе крови между матерью и ребенком высчитывается исходя из вероятной группы крови ребенка, которая, в свою очередь, зависит от того, какая группа крови у матери и у отца. Вот для оценки этого риска и необходимо сдавать анализ на определение группы крови при беременности.
Определение группы крови
Когда у врачей возникает необходимость узнать группу крови, анализ, как правило, делается заново. Так поступают, чтобы полностью исключить возможность ошибки в результате использования неверных данных. Врач не будет спрашивать группу крови у пациента, поскольку отвечает за его жизнь и должен иметь стопроцентную уверенность, что группа крови определена правильно.
Но знать свою группу крови (и группу крови своих детей) всё равно полезно. Во-первых, никто не может быть застрахован от чрезвычайных ситуаций. А во-вторых, есть определенная зависимость между группой крови и предрасположенностью к различным заболеваниям.
Как сдают анализ на определение группы крови
Кровь на анализ для определения группы крови могут брать как из пальца, так и из вены (сейчас предпочитают брать кровь из вены). Специальной подготовки к анализу не требуется. Желательно, чтобы последний прием пищи был не позднее, чем за 4 часа до анализа, но это требование не жесткое.
Где сдать анализ на определение группы крови в Москве
Вы можете сдать анализ на определение группы крови в любой из поликлиник «Семейного доктора». Одновременно можно сдать анализ на определение резус-фактора.
Оставьте телефон –
и мы Вам перезвоним
Не занимайтесь самолечением. Обратитесь к нашим специалистам, которые правильно поставят диагноз и назначат лечение.
Определение группы крови
Определение группы крови – процедура, в ходе которой анализируют антигены – белки, входящие в состав эритроцитов, красных кровяных телец. Существует несколько разновидностей антигенов и вырабатываемых ими антител, исходя из чего каждого человека, в зависимости от состава его эритроцитов, можно причислить к определенной группе крови.
Вы можете пройти определение группы крови и резус-фактора в Поликлинике Отрадное. Срок готовности результатов анализа – от одного дня. Если у вас нет времени, чтобы приехать в клинику, сдать кровь для исследования вы можете и на дому: к вам выедет медсестра.
Наши врачи
Наличие данных о собственной группе крови в критической ситуации, когда счет идет на минуты, может спасти человеку жизнь. Если такой информации нет, то врачам, перед переливанием крови придется дополнительно тратить время на исследование. Поэтому каждому пациенту рекомендуется сдать анализ на определение группы крови и всегда носить распечатку результатов исследования с собой: например, в кошельке, рядом с другими важными документами.
Определение группы крови и резус-фактора
Сейчас существует более 30 разных подходов к определению групп крови. В зависимости от используемой системы, количество групп крови может быть разным: системы Келл, Кид и Даффи выделяют 3, а MNSs – 9. И все же наиболее распространенными являются две системы:
- AB0 (А, Б, ноль);
- Резус-фактор.
Система AB0 выделяет 4 группы крови и подразумевает исследование 3 видов антигенов – A, B и H. Однако в результатах анализов H принято заменять на 0 (что говорит об отсутствии в эритроцитах антигенов A и B). Буквы дополняют цифрами – I, II, III или IV. Именно поэтому сами пациенты часто говорят о своей группе крови не в буквенном, а цифровом обозначении – первая, вторая, третья или четвертая. В ходе анализа учитывается не только присутствие/отсутствие в эритроцитах антигенов, но также и наличие в плазме крови агглютининов. Это специфические белки, антитела, атакующие «чужеродные» эритроциты. Если пациенту перелить кровь группы с не подходящими ему антигенами, агглютинины уничтожат содержащие их эритроциты.
По системе AB0 выделяют следующие группы крови:
- 0 (I) – антигены A и B отсутствуют, выявлены антитела α и β.
- А (II) – присутствуют антиген А и антитело β.
- B (III) – в наличии антиген B и антитело α.
- AB (IV) – выявлены антигены A и B, антител нет.
Система Rh (резус-фактор) подразумевает анализ антигена D – специфического белка крови, присутствующего или отсутствующего на поверхности эритроцитов. Резус-фактор будет положительным (обозначается как Rh+) при наличии антигена. При отсутствии этого белка — он отрицателен (Rh-).
Резус-фактор имеет значение лишь в 2 ситуациях:
- При переливании крови. Если в организм пациента попадает кровь с иным резус-фактором, способен возникнуть резус-конфликт. Это может привести к гемотрансфузионному шоку – редкому, но серьезному осложнению, которое выражается в значительном ухудшении самочувствия пациента, снижении артериального давления, затруднении дыхания. Иногда происходит нарушение функций сердца, печени или почек, что может стать причиной летального исхода. Резус-отрицательным людям переливают кровь исключительно с отрицательным резусом. Пациентам с положительным резус-фактором при отсутствии альтернативы можно перелить до 500 мл резус-отрицательной крови.
- При планировании беременности. Если у матери Rh отрицательный, а у отца – положительный, и ребенок унаследовал резус-фактор мужчины, при беременности может развиться резус-конфликт. Организм матери начинает воспринимать плод как «чужеродное тело» и атакует его эритроциты. В итоге ребенок испытывает кислородное голодание, может также произойти самопроизвольный аборт. Врачи способны предотвратить данные последствия и обеспечить нормальное течение беременности и рождение здорового малыша. Но для этого необходимо заранее (желательно еще до зачатия) узнать резус-факторы потенциальных матери и отца. При положительном Rh у матери опасности возникновения резус-конфликта нет, вне зависимости от резус-фактора отца.
Определение группы крови обычно подразумевает применение обеих систем: ABO и Rh.
Показания к исследованию
Анализ на определение группы крови осуществляется:
- По желанию пациента (если он хочет на всякий случай знать свою группу крови).
- Перед плановыми операциями, предполагающими кровопотери.
- Для людей, деятельность которых связана с риском получения тяжелых травм (например, военных, спасателей, пожарных).
- При планировании беременности – во избежание резус-конфликта.
- Ежемесячно во время беременности (после 32 недели чаще), если ранее было выяснено, что у женщины отрицательный Rh, а у мужчины – положительный. При выявлении отклонений от нормы будет назначено лечение.
- Для новорожденного ребенка, если у его матери отрицательный резус-фактор, а у отца положительный, даже если во время беременности не возникало проблем.
При наличии у малыша положительного Rh для профилактики резус-конфликта во время последующей беременности женщине в первые трое суток после родов вводят антирезусный иммуноглобулин.
- Для новорожденного при наличии признаков гемолитической болезни – состояния, обусловленного несовместимостью Rh матери и ребенка. Симптомами патологии являются желтуха, анемия, отеки. Выявляется гемолитическая болезнь еще во внутриутробный период.
Важно! Резус-конфликт редко возникает при первой беременности, обычно – при последующих. Это объясняется тем, что иммунная система женщины сталкивается с «чужеродным» антигеном впервые, и не успевает дать сильный ответ, но «запоминает угрозу». В следующий раз она уже отреагирует гораздо агрессивнее. Однако определение группы крови и резус-фактора необходимо проводить и перед первой беременностью. Введение антирезусного препарата после первых родов позволит избежать осложнений последующих беременностей.
Экстренно определение группы крови требуется перед переливанием крови в следующих случаях:
- при тяжелых анемиях;
- при кровотечениях (маточных, желудочно-кишечных, легочных);
- при внеплановых хирургических вмешательствах;
- при серьезных травмах, связанных с потерей большого количества крови.
Подготовка к исследованию
Специфических подготовительных мер не требуется. Однако принимать пищу рекомендуется не позднее чем за 4 часа до забора крови. Также накануне процедуры следует исключить чрезмерные физические нагрузки. Лучше прийти в клинику заблаговременно и до сдачи крови в течение 10-15 минут спокойно посидеть.
Так как на результаты исследования могут оказывать влияние некоторые заболевания, прием ряда лекарств, особенности питания и даже эмоциональное состояние пациента, анализ рекомендуется во избежание получения недостоверных результатов проводить два раза. Следует заранее предоставить врачу список всех принимаемых медикаментов.
Методы определения группы крови
В настоящее время существуют 3 основных метода определения группы крови, соответствующие системе AB0:
- Определение группы крови стандартными сыворотками.
- Метод перекрестной реакции.
- Определение группы крови цоликлонами.
Кровь для исследования обычно берется из вены, иногда из пальца.
Стандартный метод
Определение группы крови по стандартным сывороткам – наиболее простой и распространенный метод. Используемые сыворотки соответствуют 4 группам крови и окрашены в разные цвета:
- бесцветная – группы 0 (I);
- синяя (голубая) – группы A (II);
- красная (розовая) – группы B (III);
- желтая – группы AB (IV).
Справка. Изогемагглютинирующие сыворотки изготавливают из крови доноров. Они имеют срок годности и должны храниться при температуре 4-8 °С. Сыворотки выпускаются сериями, номер серии отмечают на ампуле. Для анализа берут по две сыворотки каждой группы из разных серий. Это позволяет исключить ошибку в результатах исследования.
Определение группы крови – алгоритм:
- На специальную тарелку или стекло наносят капли сывороток
- Затем в каждую каплю добавляют кровь пациента.
- Тарелку осторожно покачивают, чтобы сыворотки соединились с кровью.
- Через 5 минут наблюдают, произошла ли реакция агглютинации («склеивания» эритроцитов): если да, то в пробе образуются зерна или хлопья.
- При отсутствии реакции агглютинации во всех пробах – группа крови пациента 0 (I).
- Отсутствие реакции агглютинации в пробе с сывороткой II группы, во всех остальных агглютинация произошла – группа A (II).
- Отсутствие агглютинации в капле сыворотки III группы – у пациента группа крови B (III).
- Реакция агглютинации произошла во всех пробах – группа крови AB (IV).
Метод перекрестной реакции
Исследование подразумевает проведение двух анализов: со стандартными сыворотками и со стандартными эритроцитами. Для процедуры с эритроцитами используется сыворотка крови пациента. Ее получают путем центрифугирования биоматериала. Сыворотку подвергают воздействию стандартных эритроцитов.
Справка. Стандартные эритроциты получают из донорской крови групп 0, A и B. Для анализа берется по 2 образца одних и тех же эритроцитов из разных серий.
На тарелку наносят капли сыворотки крови пациента, а рядом с ними – капли стандартных эритроцитов. Тарелку покачивают, чтобы материалы смешались. Затем оценивают результаты:
- Если агглютинация произошла с эритроцитами групп А и B – группа крови пациента 0.
- При наличии агглютинации с эритроцитами группы B – группа крови A.
- Агглютинация с эритроцитами группы А – группа крови B.
- При отсутствии агглютинации во всех пробах – группа крови AB.
Параллельно с этим исследованием проводят анализ стандартным методом, а затем сравнивают результаты.
Определение группы крови цоликлонами
Определение группы крови с помощью цоликлонов проводится точно так же, как по стандартному методу. Результаты оцениваются тем же образом. Разница лишь в том, что вместо стандартных сывороток применяют цоликлоны анти-А и анти-B – это синтетические сыворотки, содержащие искусственные агглютинины α и β.
Определение резус-фактора
Резус-фактор может определяться с помощью:
- антирезусной сыворотки (экспресс-метод);
- цоликлона анти-D супер.
Для исследования с помощью стандартной антирезусной сыворотки могут использовать кровь пациента или эритроциты, полученные из нее. В пробирку капают стандартную антирезусную сыворотку, затем вводят каплю крови пациента или эритроциты. Пробирку вращают в руках, чтобы кровь смешалась с сывороткой. В пробирку также добавляют немного физраствора. Результаты оцениваются по наличию/отсутствию агглютинации:
- Присутствует – резус положительный.
- Отсутствует – резус отрицательный.
Анализ с помощью цоликлона анти-D супер проводится на тарелке. На нее наносят реагент, рядом располагают каплю крови. Тарелку покачивают, чтобы материалы соединились. Затем, как и в предыдущем методе, оценивают наличие или отсутствие реакции агглютинации.
Резус-фактор: отрицательный и положительный
Около 85% всех жителей планеты обладают положительным резус-фактором. Наличие или отсутствие антигена D не сказывается на самочувствии и здоровье пациента.
Правила расшифровки результатов
Результаты анализа выдаются пациенту в следующей форме:
- группа крови (0, А, В, АВ);
- резус-фактор: Rh+ (положительный) или Rh- (отрицательный).
Результаты анализа на определение группы крови будут актуальными на протяжении всей жизни. Если исследование уже было проведено, повторять его заново не требуется. Группа крови – «постоянная величина» и генетически наследуемый признак, то есть не изменяется в течение жизни. Хотя однажды у юной австралийки Деми Ли-Бреннан поменялась группа крови после пересадки печени. Но данный случай является исключением, и доктора так и не смогли однозначно объяснить этот феномен.
Иногда некоторые пациенты утверждают, что вследствие какого-то заболевания или во время беременности у них изменилась группа крови. Это можно объяснить врачебной ошибкой. И беременность, и некоторые патологии способны затруднять расшифровку результатов анализов, вследствие чего они могут получиться недостоверными. Бывают случаи, что ошибка была допущена при предыдущем исследовании крови.
Как узнать группу крови
Генетика группы крови и их полиморфизмы
Хотя весь полиморфизм — результат различий в последовательности ДНК, некоторые полиморфные локусы исследованы проверкой изменений в белках, кодируемых этими аллелями, а не изучением различий в ДНК-последовательности самих аллелей. Считают, что любой человек вероятно гетерозиготен по аллелям, определяющим структурно различающиеся полипептиды, приблизительно в 20% всех локусов; при сравнении индивидуумов из разных этнических групп полиморфизм обнаруживают даже в большей доле белков.
Таким образом, в пределах человеческого вида существует поразительная степень биохимической индивидуальности в характеристиках ферментов и других продуктов генов. Кроме того, поскольку продукты многих биохимических путей взаимодействуют, можно правдоподобно предположить, что каждый человек, независимо от состояния его здоровья, имеет уникальные, генетически определяемые биохимические характеристики и, таким образом, уникально отвечает на влияния окружающей среды, диетические и фармакологические факторы.
Это понятие химической индивидуальности, впервые выдвинутое столетие назад замечательным британским врачом Арчибальдом Гарродом, оказалось правильным.
Здесь мы обсудим несколько полиморфизмов, имеющих медицинское значение: группы крови АВО и резус-фактор Rh (важные в определении совместимости для переливаний крови) и МНС (играющий важную роль в пересадке органов и тканей). Исследования изменений в белках, а не в кодирующей их ДНК, дают реальную пользу; в конце концов, именно различные белковые продукты различных полиморфных аллелей часто ответственны за различные фенотипы и, следовательно, определяют, как генетические изменения в локусе влияют на взаимодействие организма и среды.
Группы крови и их полиморфизмы
Первые примеры генетически предопределенных изменений белков были обнаружены в эритроцитах, так называемые антигены групп крови. Известно большое число полиморфизмов в компонентах человеческой крови, особенно в АВО и Rh антигенах эритроцитов. В частности, системы АВО и Rh важны при переливании крови, пересадке тканей и органов и при гемолитической болезни новорожденного.
Система АВО групп крови
Человеческая кровь может относиться к одной из четырех групп, в соответствии с наличием на поверхности эритроцитов двух антигенов, А и В, и присутствия в плазме двух соответствующих антител, анти-А и анти-В. Существует четыре основных фенотипа: 0, А, В и АВ. Люди с группой А имеют на эритроцитах антиген А, с группой В имеют антиген В, с группой АВ — как антигены А, так и В, и наконец с группой 0 не имеют ни одного антигена.
Одна из характеристик групп АВО не распространяется на другие системы групп крови — это реципрокные отношения между наличием антигенов на эритроцитах и антител в сыворотке. Когда на эритроцитах отсутствует антиген А, сыворотка содержит анти-А антитела; когда отсутствует антиген В, сыворотка содержит анти-В антитела. Причина реципрокного отношения неизвестна, но полагают, что образование анти-А и анти-В антител — ответ на присутствие А- и В-подобных антигенов в окружающей среде (например, в бактериях).
Группы крови АВО определяются локусом в хромосоме 9. Аллели А, В и 0 в этом локусе — классический пример мультиаллелизма, когда три аллеля, два из которых (А и В) наследуются как кодоминантные, а третий (0) — как рецессивный признак, определяют четыре фенотипа. Антигены А и В определяются действием аллелей А и В на поверхностный гликопротеид эритроцитов, названный антигеном Н.
Специфичность антигенов определяется концевыми углеводами, добавляемыми к субстрату Н. Аллель В кодирует гликозилтрансферазу, преимущественно опознающую сахар D-галактозу и добавляющую его к концу цепочки олигосахаридов, содержащейся в антигене Н, тем самым создавая антиген В. Аллель А кодирует немного отличающуюся форму фермента, распознающую и добавляющую к субстрату вместо D-галактозы N-ацетилгалактозамин, создавая тем самым антиген А. Третий аллель, 0, кодирует мутантную версию трансферазы, не обладающую трансферазной активностью и не влияющую на субстрат Н.
Определены молекулярные различия в гене гликозилтрансферазы, ответственной за аллели А, В и 0. Последовательность из четырех различных нуклеотидов, различающаяся между аллелями А и В, приводит к изменениям аминокислот, изменяющим специфичность гликозилтрансферазы. Аллель 0 имеет однонуклеотидную делецию в кодирующей области гена АВО, вызывающую мутацию сдвига рамки и инактивирующую активность трансферазы у людей с группой 0. Теперь, когда известны ДНК-последовательности, определение групповой принадлежности по системе АВО можно выполнять непосредственно на уровне генотипа, а не фенотипа, особенно когда есть технические трудности в серологическом анализе, что часто случается в судебной практике или при установлении отцовства.
На видео представлена техника определения группы крови стандартными сыворотками: Видео определения группы крови
Первичное медицинское значение системы АВО — в переливании крови и пересадке тканей или органов. В системе групп крови АВО есть совместимые и несовместимые комбинации. Совместимая комбинация — когда эритроциты донора не несут антиген А или В, соответствующий антителу в сыворотке реципиента. Хотя теоретически существуют «универсальные» доноры (группа 0) и «универсальные» реципиенты (группа АВ), пациенту переливают кровь его собственной группы АВО, за исключением экстренных ситуаций.
Постоянное присутствие анти-А и анти-В антител объясняет неудачи многих ранних попыток переливания крови, поскольку эти антитела могут вызывать быстрое уничтожение АВО-несовместимых клеток. При пересадке тканей и органов для успешного приживания необходима совместимость донора и реципиента по группе АВО и HLA (описанной позже).
Система Rh групп крови
По клиническому значению система Rh сравнима с системой АВО из-за своей роли в развитии гемолитической болезни новорожденных и в несовместимости при переливаниях крови. Название Rh происходит от обезьян резусов (Rhesus), использовавшихся в экспериментах, приведших к открытию системы. Проще говоря, популяция разделяется на Rh-положительных индивидуумов, экспрессирующих в эритроцитах антиген Rh D, полипептид, закодированный геном (RHD) в хромосоме 1, и Rh-отрицательных, не экспрессирующих этот антиген. Отрицательный Rh-фенотип обычно вызван гомозиготностью по нефункциональному аллелю гена RHD. Частота Rh-отрицательных индивидуумов сильно изменяется в разных этнических группах. Например, 17% белых и 7% афроамериканцев Rh-отрицательны, тогда как среди японцев — всего 0,5%.
Гемолитическая болезнь новорожденных и группы крови
Главное клиническое значение системы Rh — то, что Rh-отрицательные лица могут легко формировать анти-Rh антитела после встречи с Rh-положительными эритроцитами. Это становится проблемой, когда Rh-отрицательная беременная вынашивает Rh-положительный плод. В норме в течение беременности небольшие количества крови плода пересекают плацентарный барьер и попадают в материнский кровоток. Если мать Rh-отрицательна, а плод Rh-положителен, мать формирует антитела, возвращающиеся к плоду и повреждающие его эритроциты, вызывая гемолитическую болезнь новорожденных с серьезными последствиями.
У Rh-отрицательных беременных риск иммунизации Rh-положительными эритроцитами плода может минимизироваться введением антирезус иммуноглобулина на сроке 28-32 нед гестации и дополнительно вскоре после родов. Иммуноглобулин человека антирезус удаляет Rh-положительные клетки плода из кровотока матери прежде, чем они ее сенсибилизируют. Антирезус иммуноглобулин также вводят после выкидышей, абортов или инвазивных процедур типа БВХ или амниоцентеза, в случаях, когда Rh-положительные клетки плода попадают в материнский кровоток. Открытие системы Rh и ее роли в развитии гемолитической болезни новорожденных — важный вклад генетики в медицину.
В свое время считавшаяся наиболее частым генетическим заболеванием у человека, гемолитическая болезнь новорожденных теперь встречается сравнительно редко из-за профилактических мер, ставших в акушерстве установившейся практикой.
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Группа крови и резус-фактор
Группа крови — это иммуногенетический признак крови, позволяющий объединить кровь по сходству антигенов в определенные группы. Для организма антиген является чуждым веществом и вызывает образование антител. У каждого человека есть антигены в плазме крови и форменных элементах: лейкоцитах, эритроцитах, тромбоцитах.
Принадлежность к той или иной группе крови зависит от присутствия или отсутствия в плазме крови естественных антител (α- и β- агглютининов) и содержания в эритроцитах чужеродных макромолекул — антигенов (агглютиногенов А и В).
Группа крови для человека — это индивидуальная особенностью, которая формируется на самых ранних сроках развития плода.
Резус-фактор (Rh) — это антиген (белок), находится на поверхности эритроцитов. У большинства людей эритроциты содержат этот белок, и у них Rh-фактор является положительным.
Если белка нет, то Rh-фактор будет отрицательный. Обычно он не приносит хозяину никаких неприятностей, только особого внимания требуют беременные женщины. Это связано с тем, что женщина вынашивает плод несовместимый по группе крови и резусу. В итоге может возникнуть резус-конфликт, угрожающий ребенку, возможен выкидыш на любом сроке беременности.
Для чего определяют группу и резус-фактор крови
В крови человека не присутствуют одноименные антитела и антигены — иначе бы это повлекло за собой разрушение клеток крови.
- определении совместимости донорской крови с реципиентом;
- подготовке пациента к оперативному вмешательству;
- рождении малыша с гемолитической болезнью.
Методика проведения анализа
- Сдавать кровь на голодный желудок.
- Накануне не злоупотреблять спиртным, избегать моральных и физических нагрузок, не переедать.
Группу крови определяют с помощью стандартных образцов сывороток, эритроцитов и солевого раствора моно-клональных антител к антигенам А и В. Образцы крови и стандарты наносят на планшет с надписями анти-В и анти-А: 1 к 10, за реакцией наблюдают 3 минуты и делают заключение.
Резус-фактор определяют так: на пластине смешивают 0,1 мл стандарта с 0,05 мл образца крови, появление через 1 минуту реакции агглютинации характерно для позитивного резуса (Rh +), отсутствие говорит о негативном резусе (Rh –).
Интерпретация полученных результатов
- Не появление агглютинации со стандартными образцами свидетельствует о первой группе — 0 (I).
- Реакция произошла с Оαβ и Вα – это характерно для второй группы A (II).
- Агглютинации нет с Вα – это третья группа B (III).
- Для четвертой группы характерно присутствие реакции со всеми стандартами — AB (IV).
В современных методах лечения при диагностировании заболеваемости пациентов опытные специалисты берут во внимание предрасположенность различных групп крови к определенным болезням.
Диагностическая ценность определения групповой и резусной принадлежности
Типирование крови считается базовым изосерологическим исследованием, его выполнение требуется при поступлении на службу в силовые структуры и многих других ситуациях. Данный метод лабораторной диагностики является важным этапом подготовки пациента к сложному оперативному вмешательству, во время которого существует вероятность гемотрансфузии – переливания крови донора. Если резус-отрицательному пациенту перелить кровь с положительным резус-фактором, его иммунная система примет ее за чужеродный антиген и начнет производство специфических плазменных белков – иммуноглобулинов (или антител). В первый раз вырабатывается небольшое их количество, но в циркулирующей крови остаются В-лимфоциты (иммунные клетки, обладающие памятью). Повторный контакт с эритроцитарными антигенами приводит к образованию большого количества белков, вызывающих массовый гемолиз (распад) красных кровяных телец донора, и развитию посттрансфузионных осложнений – гемолитической анемии, желтухи, острой почечной недостаточности, шокового состояния.
Еще одним клинически значимым фактором определения резусной принадлежности крови является возможное возникновение резус-конфликта – осложнения беременности, когда мать с отрицательным фактором (в ее эритроцитах не содержится D-антиген) носит резус-положительный плод. На поздних сроках гестации фрагменты его эритроцитов могут преодолевать транс-плацентарный барьер и проникать в кровяное русло матери и провоцировать развитие неадекватной иммунной реакции, сопровождающейся выработкой антител к D-антигену, которые способны проникать в организм ребенка и разрушать его красные кровяные тельца. При первой беременности в организме матери производится незначительное количество иммуноглобулинов и у плода не развиваются серьезные осложнения, все последующие сопровождаются хроническим гемолизом эритроцитов, провоцирующим возникновение фетального эритробластоза. Даже если не происходит преждевременного прерывания беременности, дети рождаются с гемолитической болезнью, характеризующейся низким весом, анемией, общим врожденным отеком и ядерной желтухой. Это патологическое состояние может стать причиной гибели новорожденного младенца.
Для того, чтобы предотвратить резус-конфликт, будущей матери проводят профилактику несовместимости. Начинают ее с 28-ой акушерской недели (именно в этот период повышается риск контакта красных телец плода с материнскими антителами). В кровь беременной женщины вводят антирезусный иммуноглобулин D, проводят заменные и дробные трансфузии плазмы, эритроцитарной массы и плазмозамещающих растворов. Эти манипуляции обеспечивают быстрейшую элиминацию из организма продуктов распада эритроцитов, восстановление нормального клеточного состава крови, рождение здорового ребенка и профилактику резусного конфликта при последующих беременностях.
Что может повлиять на результат исследования?
Групповая и резусная принадлежность человека обусловлена генетическими факторами и не изменяется на протяжении всей жизни. Для получения достоверных итоговых данных изосерологических тестов необходимо выполнять подготовительные рекомендации. К получению некорректных результатов анализа на резус-фактор может привети применение Леводопа (комбинированного препарата, оказывающего противо-паркинсонический эффект) и Метилдопа (гипотензивного средства центрального действия).
Кто может быть донором, а кто реципиентом?
Статистические данные Всемирной Организации Здравоохранения свидетельствуют о том, что ежегодно в мире производится почти 120 миллионов гемотрансфузий. Их выполнение обусловлено сложными травмами или родами, трансплантацией тканей и органов, оперативным вмешательством на сердце и сосудах. Донором может стать здоровый человек возрастом от 18-ти до 60-ти лет. Сдают кровь в количестве, не превышающем 400 мл, не чаще 1 раза в 3 месяца.
Конечно, идеальным считается переливание крови идентичной группы и резуса, однако в экстренных случаях можно воспользоваться следующими правилами:
- I(О) пригодна для трансфузии всем реципиентам, ее владельцы являются универсальными донорами, однако принимать они могут лишь кровь II группы;
- II(А) – донор для II и IV групп, как реципиентам подходит только I и II;
- III(В) используют для переливания лицам с III и IV группами, ей подходит I и III;
- IV(АВ) может быть донором только для IV, хотя ее владельцы – универсальные реципиенты.
Важно знать, что помимо вышеперечисленных правил, донорскую кровь обязательно проверяют на носительство ВИЧ-инфекции, сифилиса, гепатитов В и С, коронавируса.
С детства практически каждый человек знает свою группу крови и резус-фактор. Эти данные пишутся на медицинской карточке каждого пациента, который проходит лечение в больнице или обращается в поликлинику за помощью. Считается, что группа крови и резус — это обусловленные генетически характеристики, которые формируются у плода еще в утробе матери и не могут быть изменены. Однако за последние несколько десятилетий было зафиксировано множество случаев «смены» то резуса, то группы крови у одного и того же человека в течение жизни. Может ли такое произойти на самом деле? Если да, то в чем же кроется причина? Разбирался во всех тонкостях этой проблемы MedAboutMe.
Что такое группа крови и резус-фактор?
Прежде чем говорить о возможности смены группы крови и резуса, следует разобраться в основных понятиях. Как известно, кровь человека состоит не только из жидкой части, но и из форменных элементов, среди которых важнейшую роль играют эритроциты. На своей поверхности эти клетки имеют специальные сигнальные молекулы — антигены (агглютиногены). Два основных антигена — это A и B: группы крови по системе ABO определяются именно благодаря наличию или отсутствию их в организме человека.
Иммунитет реагирует на наличие антигенов, вырабатывая против них специфические антитела, которые носят называния альфа и бета (агглютинины). Если представить это в упрощенной схеме, получается всего 4 возможных комбинации:
- оболочка эритроцитов не имеет ни A, ни B антигенов, но имеются альфа и бета антитела (первая группа крови);
- есть антиген A на поверхности эритроцитов, а также присутствуют антитела бета (вторая группа крови);
- есть антиген B на поверхности красных кровяных клеток, а также есть антитела альфа (третья группа крови);
- есть и A, и B антигены, но нет антител альфа и бета для них (четвертая группа).
В крови у одного и того же человека не могут находиться антиген A и антитело альфа (а также антиген B и антитело бета): это приведет к немедленному слипанию эритроцитов между собой и к гибели человека. С резус-фактором ситуация обстоит намного проще: он определяется по наличию или отсутствию на поверхности красных кровяных клеток антигена под названием Rh.
Почему же у одних людей есть антигены, а у других нет? Вопрос о том, каким образом в процессе эволюции сформировались группы крови и резус-фактор, до сих пор остается открытым. Часть ученых предполагает, что это может быть результатом древнейшего симбиоза каких-то микроорганизмов с клетками, которое закрепилось в популяции млекопитающих.
Факт!
Помимо традиционной системы ABO существуют и другие системы, которые используются гораздо реже. Примером могут служить системы Kell и MNS. Первая применяется в трансфузиологии, когда необходимо перелить кровь пациенту с аутоиммунной анемией и гемолитической болезнью новорожденных, а вторая — в работе судебно-медицинских экспертиз.
Могут ли анализы ошибаться?
Услышать истории о «магической» смене резус-фактора или группы крови можно довольно часто. На многих форумах люди делятся случаями, которые произошли с ними или их знакомыми и родственниками. Зачастую в таких историях группу крови и резус-фактор первый раз определяют в далеком детстве, после чего человек довольно продолжительное время не сдает никаких анализов. Как бы сильно не хотелось уверовать в собственную уникальность и исключительность, стоит помнить, что всегда есть место диагностической ошибке.
Группа крови определяется благодаря использованию специальных сывороток, которые содержат антитела альфа, бета и альфа+бета. Небольшую каплю сыворотки смешивают на специальном планшете с кровью человека, после чего внимательно наблюдают за склеиванием (агглютинацией) эритроцитов. Первая группа крови не дает реакцию агглютинации ни с одной из сывороток, четвертая — дает со всеми, вторая — с сывороткой, где есть антитела альфа, третья — где имеются антитела бета.
В настоящее время для достоверного определения группы крови и резус-фактора исследование проводится несколько раз, при этом используются качественные и свежие реактивы. А была ли такая возможность у какой-нибудь небольшой сельской больницы еще 30-40 лет назад? Плохое качество реагентов, использование просроченных материалов, несоблюдение температурного режима и преждевременная оценка результатов — все это может стать вполне банальными причинами «изменения» группы крови и резуса. Также не стоит забывать и о человеческом факторе: неправильное нанесение личных данных пациента на планшет, где проводится реакция, или перепутанные анализы отнюдь не являются редкостью.
Беременность и другие причины временного «изменения» группы крови
Если проанализировать большинство рассказов о смене резуса и группы крови, можно заметить, что именно беременность являлась ключевым моментом. Известно, что во время беременности женский организм претерпевает существенные изменения. В частности, увеличивается объём циркулирующей крови и количество эритроцитов, а количество агглютиногенов падает. Это приводит к тому, что при проведении исследования красные кровяные клетки в ряде случаев могут не склеиваться между собой. Таким образом ранее существовавшие вторая, третья и даже четвертая группы крови «превращаются» в первую. Но если пересдать анализ через несколько месяцев после родов, он будет гораздо более точным, и группа крови «восстановится».
Также причиной «изменения» группы крови может стать панагглютинация. При этом явлении кровь пациента вступает в реакцию со всеми диагностическими сыворотками, приводя к склеиванию эритроцитов. Это встречается у тяжелобольных пациентов при хронической почечной, печеночной недостаточности, гематологических и онкологических заболеваниях. Чтобы избавиться от явления панагглютинации, необходимо прогреть планшет в термостате, после чего будет получен верный результат.
Кто такие химеры и почему их кровь столь необычна?
Казалось бы, поменять группу крови или резус-фактор действительно невозможно. Однако существует поистине уникальное явление — химеризм. Чтобы разобраться в этом, MedAboutMe обратился к греческой мифологии. Химера — это существо, имеющее голову льва, тело козы и хвост змеи, которое обладало нечеловеческой силой и было предвестником несчастий. В биологии же химерами называют организмы, которые имеют генетически разнородный материал. Встречается ли такое среди людей?
Примерами естественного и природного химеризма могут быть близнецы. Считается, что во время нахождения в утробе матери плоды обмениваются тканями, а также кровью. При этом нормальная физиологическая реакция иммунитета (отторжение чужеродного материала) угнетается. Интересно, что нередко встречается так называемый феномен исчезнувшего близнеца, когда один плод в утробе матери «поглощает» другой, присваивая его клетки, которые продолжают развиваться в его организме. Таким образом у одного человека могут быть обнаружены сразу две группы крови или же два разных резус-фактора.
Случаи искусственного химеризма встречаются крайне редко. Это явление связано с пересадкой донорских органов или многократным переливанием чужеродной крови первой группы пациенту со второй, третьей или четвертой группой.
Факт!
Один из самых уникальных случаев за всю медицинскую практику произошел в Австралии. Девятилетней девочке по имени Деми Ли Бренанн понадобилась трансплантация печени. Хирургическое вмешательство прошло успешно, но после него в организме ребёнка начали происходить поистине «магические» процессы. Как говорят врачи, кровь девочки из первой группы с резус-отрицательным фактором стала резус-положительной. Анализы показали, что стволовые кровяные клетки донорской печени попали в костный мозг юной пациентки и взяли под контроль ее иммунную систему. Таким образом отпала и необходимость в приеме иммуносупрессивных препаратов: новый орган не воспринимался иммунитетом как нечто чужеродное.
Группы крови – вирусно-генетическое заболевание человека, обезьян и других животных / Тюняев А.А. // Вестник новых медицинских технологий – 2011 – №1
Причины ошибок при исследовании групповой принадлежности крови и меры их предупреждения / Лунина Г. В. // Проблемы науки – 2019 – №7
Ошибки первичного определения группы крови лечащим врачом / Жибурт Е. Б., Караваев А. В., Глазов К. Н. и др. // Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н.И. Пирогова – 2012 – №3