Ошибки при постановке ифа

2001

Институт средств медицинской диагностики

ЗАО «Вектор-Бест»

А.В. Масяго

НЕКОТОРЫЕ ОШИБКИ

ПРИ ПОСТАНОВКЕ ИФА

Информационно-методическое пособие

©

ББК

Т

Некоторые ошибки при постановке ИФА. – Новоси-

Т бирск, 2001. – 132 с.

ББК

3

Многолетний опыт работы ЗАО «Вектор-Бест» по произ-

водству иммуноферментных тест-систем, постоянный кон-

такт с широким кругом потребителей продукции, как из хорошо

оснащенных диагностических центров, так и из лабораторий,

имеющих минимально необходимое для постановки иммунофер-

ментного анализа (ИФА) оборудование, дает нам возможность

классифицировать и вскрыть причины некоторых ошибок, допус-

каемых при проведении иммуноферментного анализа. Автор не

претендует на полноту освещения проблемы, однако надеется,

что эта брошюра может быть полезна для наших читателей,

использующих в своей работе ИФА.

Сотрудники ЗАО «Вектор-Бест» будут благодарны всем за

любые замечания, предложения и описания случаев из личной

практики, которые обязательно будут учтены при подготовке

нового, более полного издания.

4

1. Помещение

Требования к помещениям изложены в ведомственных инс-

трукциях. В реальной жизни руководителям достаточно трудно

выполнить все предписания, поэтому зачастую для проведения

ИФА используются приспособленные в той или иной степени по-

мещения. Далее приведены некоторые факторы, которые могут

повлиять на результат анализа.

Температура воздуха в лаборатории

Во многих тест-системах при проведении анализа по инструк-

ции рекомендуется вести инкубацию планшетов при комнатной

температуре. Под этим подразумевается температура 18–25°С. На

практике температура в помещениях лабораторий варьирует от 12

до 30°С, что может привести к неправильным результатам тести-

рования. В некоторых лабораториях пытались уменьшить влия-

ние температуры воздуха на результат реакции с помощью изме-

нения времени инкубации, однако общих формул оценки влияния

соотношения температуры и времени инкубации на оптическую

плотность не существует. Поэтому единственным способом избе-

жать этой ошибки является установка планшетов при выполне-

нии этой операции в настроенный на комнатную температуру

термостат (если температура ниже комнатной), либо прекращение

работы (если температура выше).

Обычно в состав тест-системы входят концентраты растворов,

которые перед постановкой необходимо развести дистиллирован-

ной водой. В инструкциях по применению часто не указывается,

но подразумевается, что дистиллированная вода имеет комнатную

температуру. При использовании слишком холодной дистилли-

рованной воды, особенно в растворах, предназначенных для раз-

ведения сывороток и конъюгата, можно получить неправильный

результат, независимо от температуры, при которой будет прово-

диться инкубация. Вероятность получения неправильного резуль-

тата в этом случае выше, если продолжительность инкубации мала

(например, 30 мин).

5

Относительная влажность воздуха

Как правило, влияние этого фактора менее существенно. Од-

нако, если используются длительные времена инкубации при ком-

натной температуре, то при сухом воздухе (обычно относительная

влажность воздуха в помещениях ниже в зимний период) лучше

использовать влажную камеру. В противном случае происходит

подсыхание раствора с образованием «ободка» на боковой поверх-

ности лунки планшета, который при промывке может сохраниться

и повлиять на результат анализа на следующих его стадиях. Сле-

дует заметить, что если используется настроенный на комнатную

температуру термостат при низкой температуре воздуха в лабора-

тории, то относительная влажность в термостате обычно намного

ниже относительной влажности в помещении.

Недостаточная вентиляция

Душный воздух в лаборатории приводит к быстрой утомля-

емости лаборанта, и, как следствие, к увеличению числа ошибок

(неправильный отбор проб пипеткой, занос пробы в другую лунку

и т.д.). Следует отметить, что в большинстве тест-систем в инструк-

циях указано на необходимость применения масок либо респира-

торов, что и без плохой вентиляции затрудняет дыхание.

Общая загроможденность

Для постановки анализа необходимо достаточное количество

площади лабораторного стола. В противном случае возрастает ве-

роятность пролива растворов, они могут быть перепутаны и т.п.

6

2. Оборудование и расходные материалы

Проверка автоматической пипетки

В инструкциях по применению большинства тест-систем ука-

зано, что погрешность пипеток не должна превышать 5%. Непра-

вильное дозирование растворов на любой стадии анализа может

привести как к росту, так и к снижению оптической плотности, за-

меряемой при оценке результата анализа.

Наиболее простой способ проверки пипетки – взвешивание

дистиллированной воды, дозируемой пипеткой. Вес 1 мкл дистил-

лированной воды при комнатной температуре с большой точнос-

тью равен 1 мг. Таким образом, настроив пипетку на дозу 100 мкл,

мы должны получить вес воды около 100 мг. Желательно сделать

несколько повторов для того, чтобы убедиться в воспроизводимости

результатов. Весы, позволяющие измерять вес от 10 до 200 мг с не-

обходимой точностью, достаточно доступны и просты в обращении.

Не стоит пытаться проверять точность дозирования много-

кратным повтором с последующим измерением суммарного объема

с помощью мерного цилиндра. Такой способ не позволяет обнару-

жить пипетку, которая дозирует правильный средний объем при

сильном разбросе между последовательными дозами. (Напри-

мер, пипетка настраивается на дозирование 100 мкл, произво-

дится 20 дозирований, с помощью мерного цилиндра измеряется

объем, который должен составить около 2 мл. Пипетка дозирует

случайным образом от 85 до 115 мкл, что, при большом количестве

дозирований, приводит к ожидаемому объему.)

Промыватели планшетов

Наиболее характерным источником погрешностей является

засорение каналов промывателей. Недостаточная промывка при-

водит обычно к завышению сигнала. Обнаружить это достаточно

просто – при использовании рядного промывателя повышенный сиг

нал имеет один из рядов, при использовании 96-канального – одна

и та же лунка разных планшетов. Необходимо отличать такую не-

исправность от неисправности многоканального спектрофотометра.

7

Менее часто встречается засорение пространства между иг-

лами промывателя (труднее визуально это обнаружить у авто-

матических промывателей) кусочками марли или ваты. Такое

засорение приводит к заносу растворов из одной лунки в другие,

оптическая плотность в соседних по ряду от сильноположительно-

го образца лунках повышена, при этом оптическая плотность тем

меньше, чем далее расположена лунка от положительного образца

(как при титровании).

Как ручные, так и автоматические промыватели в конце рабо-

чего дня следует тщательно промывать дистиллированной водой

для предотвращения проростов в шлангах.

Посуда

Посуда должна быть чистой. Необходимо выделить отдельную

посуду для приготовления и манипуляций с растворами конъюга-

та, ТМБ и ОФД. Посуду для растворов ТМБ, ОФД и конъюгата

необходимо мыть более тщательно, так как влияние возможных

загрязнений на эти растворы сильнее отражается на результате

анализа. Особенности мытья посуды и манипуляций с раствором

ОФД изложены в инструкциях по применению тест-систем.

Предлагаемая методика подготовки одноразовых наконечни-

ков к повторному использованию дана в приложении.

Термостаты

В целом, благодаря отсутствию подвижных деталей, термо-

статы редко выходят из строя. Однако желательно периодически

проверять температуру с помощью дополнительного контрольного

термометра. В некоторых термостатах неудачной конструкции мо-

жет наблюдаться высокая разность температур между нижней и

верхней полками.

Следует учитывать, что при низкой относительной влажнос-

ти в лаборатории (зимний период) или при низкой температуре

в помещении относительная влажность в термостате может стать

настолько малой, что даже при небольших временах инкубации

возможно подсыхание растворов в лунках. В таких случаях лучше

использовать влажную камеру или заклеивать планшет липкой

пленкой.

8

Спектрофотометры

Многоканальные спектрофотометры являются самыми слож-

ными из необходимых для постановки иммуноферментного анали-

за приборов.

Спектрофотометры различных фирм могут сильно отличать-

ся конструктивно, поэтому невозможно в рамках данной брошюры

указать на все возможные нарушения правил эксплуатации этих

приборов. Можно только отметить наиболее распространенные

ошибки и неисправности.

Во-первых, следует совместно со специалистами правильно

подключить прибор. Часто требования к колебаниям напряжения

в сети очень жесткие (обычно они указаны в инструкции к прибору),

специалисты на местах знают типичные колебания напряжения и

могут посоветовать те или иные меры противодействия.

Во-вторых, обычно спектрофотометры требуют длительного

времени прогрева, что указано в инструкции по эксплуатации.

Нарушение данного требования может привести к неправильному

измерению оптической плотности. Поэтому, если ожидается изме-

рение оптической плотности примерно через 30 минут после очеред-

ного измерения, прибор лучше оставить включенным. В большинстве

спектрофотометров наименьшим ресурсом обладает источник

света – мощная лампа, во многих инструкциях указан пересчет

влияния каждого включения на ресурс лампы (например, 1 вклю-

чение равносильно 40 минутам работы лампы).

Спектрофотометры обычно имеют допустимую погрешность

измерения до 10%. Проверить это можно, например, промеряя

дважды подряд один и тот же планшет сразу после постановки

ИФА и вычисляя различие в величине оптической плотности в

одинаковых лунках. При этом желательно развернуть планшет

так, чтобы лунка А1 заняла место лунки Н12. Следует учитывать,

что при оптической плотности выше 1,5 о.е. погрешность спектро-

фотометра может возрастать ввиду конструктивных особенностей

прибора.

Марля или фильтровальная бумага

В практике приходилось сталкиваться с такими случаями.

При удалении мелких капель из планшета (простукивание) ис-

пользовалась марля. Ввиду перебоев в снабжении марля исполь-

зовалась многократно, периодически обрабатывалась раствором

хлорамина. После одной из обработок марля не была достаточно

9

промыта от остатков хлорамина, что привело к попаданию хлора-

мина в лунки планшетов при простукивании. В результате в слу-

чайном наборе лунок наблюдалось повышение сигнала до 0,8 о.е.,

даже в контроле конъюгата. После смены марли «выбросы» по оп-

тической плотности исчезли.

Фильтровальную бумагу для простукивания желательно ис-

пользовать однократно.

Дистиллированная вода

Формальные требования к качеству дистиллированной воды

приведены в соответствующем ГОСТе (основные показатели: масса

сухого остатка после выпаривания – не более 5 мг/л, рН – 5,4–6,6,

удельная проводимость при 20°С – не более 0,0005 См/м). В прак-

тике приходилось сталкиваться с влиянием качества воды на ре-

зультат реакции во многих лабораториях.

Влияние качества дистиллированной воды на результат ре-

акции чаще наблюдается весной и осенью, что, по-видимому, свя-

зано с ухудшением качества водопроводной воды.

Правильная эксплуатация и своевременная профилактика

дистилляторов не является достаточным условием.

При долгом хранении дистиллированной воды возможен бак-

териальный пророст. Желательно не хранить дистиллированную

воду более 2–3 дней. Не следует добавлять в дистиллированную

воду в качестве консерванта азид натрия, так как он является

ингибитором пероксидазы и может повлиять на активность конъ-

югата при разведении. Если дистиллированная вода хранилась

в холодильнике, то перед приготовлением растворов для ИФА ее

следует прогреть до комнатной температуры, в противном случае

возможно понижение оптической плотности.

Планшет для предварительного

разведения сывороток

Если используется планшет для предварительного разведе-

ния сывороток, то следует использовать этот планшет однократно.

Нельзя применять для предварительного разведения неис-

пользованные планшеты из наборов с сорбированными антигена-

ми или антителами.

10

3. Подготовка образцов

Данная глава несколько выходит за рамки настоящей брошю-

ры, однако неправильное приготовление образцов может сущест-

венно повлиять на все последующие результаты анализа.

Рекомендуемое приготовление сыворотки: отстаивание 0,5–1 час

при 37°С в термостате для быстрого формирования фибринового сгус-

тка (не превратившийся в фибрин фибриноген является источником

ложнопозитивных реакций во многих тест-системах), центрифугиро-

вание 10 минут при 3 000 об/мин или 20 мин при 1 500 об/мин.

При приготовлении сывороток должны быть приняты все меры,

позволяющие исключить контаминацию.

Случай из практики: на одной из СПК количество ложно-

положительных результатов было намного выше обычного уров-

ня, при поиске причин удалось выяснить, что при заборе проб ис-

пользовалась стеклянная пипетка, которая ополаскивалась пе-

ред забором следующей пробы физраствором, в случае попадания

в исследуемые за день пробы высокотитражного образца количес-

тво ложноположительных реакций резко возрастало.

Более сложны для расследования случаи ошибочной марки-

ровки проб или сознательной их подмены.

11

4. Инструкция по применению

При получении новой серии наборов даже хорошо Вам знако-

мой тест-системы следует прочитать инструкцию. Прогресс в им-

муноферментном анализе в настоящее время сравним с прогрес-

сом в вычислительной технике. В связи с этим, практически все

тест-системы совершенствуются, что может отразиться на методи-

ках подготовки реактивов и протоколе реакции.

В случае возможных разночтений в инструкции лучше позво-

нить производителям и разрешить возникший вопрос – не следует

экспериментировать самим.

Наиболее распространенное сознательное нарушение инс-

трукции при постановке анализа – сокращение времени инку-

бации раствора ОФД, осуществляемое в целях уменьшения ко-

личества ложноположительных результатов. При этом причина

возникновения завышенного количества ложноположительных

результатов (заводской брак, неправильная транспортировка, не-

правильное хранение, неверная постановка анализа) не выясня-

ется и не устраняется. Такие изменения протокола ИФА могут су-

щественно снизить выявляемость слабоположительных образцов,

т.е. привести к ложноотрицательным результатам.

Многие требования к хранению реагентов, подготовке и

проведению реакции подразумеваются, но иногда не указаны в

инструкции. Ниже приведены некоторые из таких требований

(за основу взята инструкция по применению тест-системы Ortho

HCV v3.0).

Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) – это положительные реакции у людей, которые никогда не болели и в момент обследования не болеют сифилисом. То есть специфической инфекции в организме нет и не было, а серологические реакции дают положительный результат.

Ложноположительными, или неспецифическими результатами называют положительные результаты серологических реакций на сифилис у лиц, не страдающих сифилитической инфекцией, и не болевших сифилисом в прошлом.

Ошибочный анализ на сифилис из-за технических причин

ЛПР могут быть обусловлены техническими погрешностями и ошибками при выполнении исследований, а также качеством реагентов. Несмотря на многочисленные достоинства диагностикумов для РПГА, ИФА и РИФ и их модификаций, применяемых для диагностики сифилиса, в отдельных случаях отмечаются недостоверные результаты анализов. Это может быть связано как с недостаточным уровнем квалификации и профессиональной ответственности персонала (так называемые небиологические или технические ошибки), так и с особенностями тестируемых образцов (биологические ошибки).

Ошибки небиологического характера могут возникать на любом этапе проведения исследований: преданалитическом, аналитическом, и постаналитическом т.е. при заборе, транспортировке, хранении биоматериала, использовании хилезной, проросшей сыворотки, при неоднократном замораживании и оттаивании тестируемых образцов, а также при использование диагностикумов с истекшим сроком годности и т.д. В частности, несоблюдение условий и сроков хранения диагностических наборов является причиной снижения чувствительности реакции и получения ложноотрицательных результатов.

Ложноположительные результаты может вызвать контаминация сывороток пациентов, серонегативных в отношении бледной трепонемы, следами сывороток серопозитивных лиц, что может иметь место при приготовлении сывороток.

Существует множество других технических ошибок, приводящих к получению недостоверных (ложноотрицательных и ложноположительных), сомнительных результатов исследования. В некоторых лабораториях не осуществляется внутри- и внешнелабораторный контроль качества исследований на сифилис, что ведет к получению диагностических ошибок и неуверенности врачей-лаборантов в результатах анализа.

Источником ошибок при постановке неспецифических тестов могут быть неиспользование контрольных сывороток, неравномерная концентрация антигена в опыте из-за недостаточного перемешивания ее перед использованием, контаминация образцов и посуды микроорганизмами, нарушение сроков и условий хранения компонентов реакции, нарушение техники взятия крови.

В современных тест-системах в качестве антигена нашли применение рекомбинантные или синтетические пептиды. Первые получили большее распространение. Но при плохой очистке в смесь антигенов T. pallidum попадают белки Escherichia coli, что приводит к ложной серодиагностике сифилиса у больных эшерихиозом или здоровых, в сыворотке которых обнаружены антитела к кишечной палочке.

В определенной степени к диагностическим ошибкам следует отнести и неправильную трактовку результатов исследования.

Острые и хронические ЛПР

Помимо технических ошибок при выполнении тестов, ЛПР могут быть обусловлены и особенностями организма. Условно ЛПР разделяют на острые (хронические (сохраняются более 6 месяцев).

Острые ЛПР могут наблюдаться при беременности и во время менструации, после вакцинации, после недавно перенесенного инфаркта миокарда, при многих инфекционных заболеваниях. Инфекции, при которых могут отмечаться ЛПР — пневмококковая пневмония, скарлатина, инфекционный эндокардит, туберкулез, лепра, венерическая лимфогранулема, шанкроид (мягкий шанкр), лептоспироз и другие спирохетозы, ВИЧ-инфекция, инфекционный мононуклеоз, малярия, ветряная оспа, вирусные гепатиты, паротит, корь, респираторные заболевания, грипп и дерматозы.

Хронические ЛПР возможны при аутоиммунных заболеваниях, системных болезнях соединительной ткани, онкологических заболеваниях, хронической патологии печени и желчевыводящих путей, при сердечно-сосудистой и эндокринной патологии, при заболеваниях крови, при хронических заболеваниях легких, при инъекционном применении наркотиков и др. При большинстве этих состояний выявляют антикардиолипиновые антитела классов IgG и IgM («реагины»).

Хронические ложноположительные реакции могут являться преклиническими проявлениями тяжелых заболеваний. При злокачественных новообразованиях, диффузных болезнях соединительной ткани титр ЛПР может быть очень высоким.

Среди причин хронических положительных реакций выделяют физиологические состояния (пожилой возраст). С возрастом количество ЛПР увеличивается, у женщин они наблюдаются в 4,5 раза чаще, чем у мужчин. В возрастной группе 80-летних лиц распространенность ЛПР составляет 10%.

Причиной ЛПР могут быть частое использование вводимых внутривенно препаратов, частые переливания и инфузии.

Хронические инфекции (туберкулез, лепра, инфекционный эндокардит, малярия), миелома также могут стать причинами ЛПР.

Заражение другими видами спирохет

Ложноположительные реакции трепонемных и нетрепонемных тестов могут наблюдаться при инфекционных заболеваниях, возбудители которых имеют антигенное сходство с бледной трепонемой. Это возвратный тиф, лептоспироз, клещевой боррелиоз, тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта), а также воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий.

Возбудители эндемических трепонематозов (фрамбезия, пинта, беджель) — это трепонемы, которые обладают родоспецифическими антигенами, сходными с антигенами T.pallidum. В связи с этим антитела, образующиеся к ним, способны вступать в перекрестные взаимодействия с антигеном возбудителя сифилиса.

Россия не является территорией, эндемичной по данной группе заболеваний. Эти инфекции встречаются главным образом, в странах Африки, Латинской Америки и Южной Азии, и случаи заболеваний редки в практике лечебных учреждений.

Пациента с положительными серологическими реакциями на сифилис, прибывшего из страны с эндемическими трепонематозами, необходимо обследовать на сифилис и назначить противосифилитическое лечение, если оно ранее не проводилось.

Начиная с 1938 года, и особенно во время Второй Мировой войны, в США стали широко проводиться скрининговые серологические исследования для выявления сифилиса. Исследователи сопоставили полученные данные и выяснили, что положительная или сомнительная реакция обнаруживалась у людей не имевших клинических и эпидемиологических признаков сифилитической инфекции или контактов по сифилису. Причем такие результаты возникали гораздо чаще, чем предполагалось ранее. Положительные результаты нетрепонемных тестов с липидными или кардиолипиновыми антигенами (VDRL, в тестах Колмера, реакции Кана) были обнаружены у пациентов с различными заболеваниями, но не имеющих признаков сифилитической инфекции. Биологические ложнополжительные результаты были выявлены у пациентов с аутоиммунными, воспалительными и гематологическими заболеваниями.

В русскоязычной медицинской литературе этот феномен получил наименование «биологическая ложноположительная реакция Вассермана» (Б-ЛПРВ), т.к. указанные результаты наблюдались при проведении самого распространенного теста тех времен — реакции Вассермана.

Оказалось, что Б-ЛПРВ может встречаться в двух основных вариантах — остром и хроническом. В первом случае у больных, перенесших какую-либо, но не сифилитическую инфекцию, Б-ЛПРВ исчезает в процессе выздоровления, и длительность ее обнаружения не превышает шести месяцев. Во втором случае Б-ЛПРВ может устойчиво сохраняться в течение многих лет в отсутствие очевидного причинного фактора. В начале 50-х годов было установлено, что наиболее часто хроническая Б-ЛПРВ выявляется при аутоиммунных заболеваниях, особенно СКВ, при которой частота ее обнаружения достигает 30—44%

Ложноположительность нетрепонемных (кардиолипиновых) тестов

Липидные антигены T. pallidum cоставляют значительную часть клетки, однако в организме могут присутствовать и имеющие такое же строение липиды – аутоантигены, образующиеся в результате разрушения органов и тканей (в основном липиды митохондриальных мембран).

Сифилитическая инфекция сопровождается образованием иммунных комплексов и аутоиммунным ответом на кардиолипин, фибронектин, коллаген и мышечную креатинкиназу. В нетрепонемных тестах в качестве антигена используют раствор трех высокоочищенных липидов (кардиолипин, стабилизированный лецитином и холестерином) в этиловом спирте. Кардиолипин не является специфичным компонентом для T. pallidum, а также описан как один из фосфолипидов биомембран человека. Поэтому антитела к этому антигену регистрируют в сыворотке практически при любой альтерации клеток человека в результате инфекций и при некоторых физиологических и патологических состояниях.

Так как антиген, используемый в нетрепонемных реакциях, обнаруживается в других тканях, тесты могут давать положительные результаты у лиц без трепонемной инфекции (1—2 % в общей популяции).

Наиболее частой причиной биологических ложноположительных нетрепонемных тестов является антифосфолипидный синдром — аутоиммунный процесс, встречающийся при заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке, дерматомиозите, склеродермии).

При использовании нетрепонемных тестов (РМП и ее модификаций) ложноположительные результаты могут быть обусловлены наличием в крови антител к ревматоидному фактору, перекрестно реагирующих антител при аутоиммунной патологии («кресс-реактеры»).

Другими факторами возникновения ложноположительных результатов считаются некоторые хронические бактериальные инфекции (лепра и др.), заболевания вирусной этиологии (инфекционный мононуклеоз), системные болезни соединительной ткани.

Причины также могут заключаться в пожилом возрасте (старше 70 лет), беременности, обширной соматической патологии, нарушениях обмена липидов, иммунодефицитных состояниях различной этиологии, системными хроническими заболеваниями сердца, легких.

Среди других причин следует отметить онкологические заболевания, туберкулез, энтеровирусные инфекции, вирусные гепатиты, болезнь Лайма, пневмонии, алкоголизм, наркоманию, сахарный диабет, вакцинацию, другие инфекции (малярия, ветряная оспа, корь, эндо- и миокардиты), подагру.

При этих состояниях отмечается развитие иммунологических нарушений, приводящих к аномальной продукции антител, способных перекрестно реагировать и с трепонемными антигенами.

Ложноположительность трепонемных тестов

Проблема усугубляется тем, что трепонемные тесты также могут быть ложноположительными. Причинами могут являться аутоиммунные заболевания, коллагенозы, болезнь Лайма, беременность, лепра, герпес, малярия, инфекционный мононуклеоз, опухоли, наркомания. В последние годы для дифференциации ЛПР за рубежом начали активно использовать иммуноблоттинг — один из самых современных методов диагностики сифилиса.

Сохранение антител после успешного лечения

Специфические диагностические реакции длительное время остаются положительными даже после полноценной терапии. После эффективного лечения сифилитической инфекции, у большинства больных титры в нетрепонемных тестах снижаются в 4 раза через 6–12 месяцев после лечения. Однако, при позднем начале терапии, титры даже в нетрепонемных тестах могут сохраняться на прежнем уровне, но никогда не увеличиваться.

Ложноотрицательные результаты анализов

Различные методы диагностики демонстрируют различную чувствительность и специфичность в зависимости от формы и стадии сифилиса. Вероятность ошибочного диагноза возрастает, особенно в случаях латентного, скрытого, сочетанного течения заболевания.

Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена прозоны при тестировании неразведенной сыворотки, а также при обследовании лиц с иммунодефицитным состоянием, например ВИЧ-инфицированных пациентов.

Ложноотрицательные результаты серологических специфичес- ких реакций (РПГА), вызванные биологическими факторами, могут быть обусловлены конкуренцией между специфическими IgM и IgG за связывание с антигеном на поверхности эритроцитов, а также «феноменом прозоны». В последнем случае агглютинация не происходит из-за гиперпродукции антител к бледной трепонеме, поскольку каждый антиген-рецептор на эритроцитах из-за избытка антител связан с одной молекулой агглютинина, что препятствует образованию «решетки». Замена РПГА на TPPA, т.е. эритроцитов на синтетические частицы, видимо, исключит или минимизирует получении ложноотрицательных результатов.

В ИФА такие реакции можно объяснить наличием серонегативной фазы при первичном сифилисе, а при вторичном — иммунной недостаточностью, наличием ВИЧ-инфекции. При получении отрицательного результата серологических исследований на сифилис следует учитывать свойство бледных трепонем проникать и размножаться в различных органах и тканях — поиск возбудителя в лимфе (лимфатических узлах) в ряде случаев приводит к достоверному результату. Целесообразно повторить также анализ образцов, давших положительный результат. Повторное, через 5–7 и более дней, исследование сывороток, как правило, позволяет получить достоверные результаты.

Анализы на гепатит С

Вирусный гепатит долгое время может протекать без симптомов, поэтому часто гепатит С выявляется случайно при рядовом обследовании.

Разберемся, какие показатели и в каком порядке сдавать при подозрении на гепатит С, что означает каждый анализ и какое обследование еще может понадобиться.

Анализы крови при гепатите C

1. Антитела к гепатиту С (anti-HCV). Если вы подозреваете, что можете быть заражены вирусом или хотите провериться, то это первый анализ крови, который нужно сдать. Антитела — это маркер того, что иммунная система вашего организма знакома с вирусом и выработала защитные антитела к нему. Однако наличие антител еще не говорит о болезни.

После попадания вируса гепатита в кровь формируется острая форма гепатита С, у которой есть 2 возможных исхода:

1. По различным данным в 15-40% случаев происходит спонтанное излечение. Антитела остаются в крови навсегда.
2. В остальном большинстве острая форма гепатита становится хронической (ХВГС).

2. Качественный анализ на вирус гепатита С (РНК вируса) методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) — следующий этап обследования, в случае выявления антител к вирусу гепатита С. Анализ выявляет генетический материал вируса (РНК). Положительный результат свидетельствует о присутствии и размножении вируса в крови и о необходимости лечения.

Вирус определяется в среднем через 2-6 месяцев после заражения. Чтобы убедиться, что активного вируса в организме нет, необходимо сдавать анализ на антитела через 3, 6 и 12 месяцев после предполагаемого заражения.

3. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР — следующий этап. Выявление количества копий/МЕ вируса на 1 мл крови (вирусная нагрузка) очень важно для оценки активности вируса, прогноза течения заболевания и, в последующем, оценки результативности терапии.

В клинике ЭКСПЕРТ качественный и количественный анализ выполняется наиболее точным методом молекулярно-биологического анализа в условиях лаборатории Центра по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями.

Одновременно с количественным анализом следует провести генотипирование вируса. В России встречаются 1, 2, 3 и 4 генотипы вируса гепатита С. От результата этого анализа полностью зависит выбор препаратов для лечения заболевания.

После успешного прохождения лечения качественный анализ рекомендуется сдавать в течение 1 года в качестве контроля и далее 1 раз в год.

Другие виды диагностики при гепатите C

Вирус гепатита С преимущественно поражает клетки печени, поэтому при его выявлении необходимо полноценное обследование этого органа.

1. Вирусологические диагностика дополняется клиническим и биохимическими показателями (АЛТ, АСТ, общий и прямой билирубин, ГГТП, щелочная фосфотаза и прочие — список формирует лечащий врач). Этот набор анализов сдается регулярно: перед началом, раз в месяц во время и в течение года после лечения. Это необходимо для контроля состояния печени и ее реакции на терапию.
2. Инструментальная диагностика, в первую очередь подразумевающая УЗИ органов брюшной полости с эластографией печени. Врач УЗ-диагностики в заключении описывает форму, размер, положение, структуру печени и желчного пузыря, а при помощи эластографии — стадию фиброза/цирроза печени.
3. Дополнительно врач может назначить специальный тесты ФиброМакс или ФиброАктиТест. Это комплексный анализ крови, также необходимый для диагностики фиброза, стеатоза печени и активности разрушительных процессов.

Независимо от того, беспокоят ли вас симптомы, гепатит С подлежит лечению. Без лечения со временем заболевание может привести к циррозу, раку печени и даже к летальному исходу. Тяжелая стадия цирроза может потребовать трансплантации печени.

В клинике ЭКСПЕРТ вы получите полноценное и только необходимое обследование, развернутую консультацию врача и помощь на всех этапах лечения гепатита С.

Вопросы о диагностике гепатита С

Сколько делаются анализы на гепатит C?

Срок выполнения анализов в клинике ЭКСПЕРТ:

• anti-HCV — 2-3 рабочих дня
• молекулярно-биологическое исследование HCV (качественный анализ) — 5-6 рабочих дней
• молекулярно-биологическое исследование HCV (количественный анализ) — 8-9 рабочих дней
• анализ на генотип гепатита С — 5-6 рабочих дней.

Что значит неопределенный или сомнительный результат?

Сомнительный анализ на гепатит С может быть при следующих условиях:

• недостаточное количество биоматериала (крови) на анализ
• повреждение биоматериала
• недостаточная подготовка пациента перед сдачей анализа (любые анализы лучше сдавать натощак!)
• наличие другой активно протекающей инфекции в момент сдачи анализа
• заражение гепатитом С произошло недавно и еще не закончился инкубационный период.

При сомнительном результате анализ необходимо сдать повторно через 2-4 недели.

Что такое ПЦР?

ПЦР — полимеразная цепная реакция — метод молекулярной биологии, суть которого заключается в многократном умножении участка РНК вируса гепатита С в лаборатории. В результате количества биологического материала становится достаточно для визуального изучения.

Где сдать анализ на гепатит С?

Сдать анализы на вирусный гепатит можно в большинстве лабораторий Санкт-Петербурга, а также в специализированной клинике. В клинике ЭКСПЕРТ врач-гепатолог поможет интерпретировать результаты и при необходимости назначит лечение.

Гепатит C. Описание заболевания.

Гепатит С – это медленно прогрессирующее инфекционное, вирусное заболевание печени с гемоконтактным механизмом передачи возбудителя (передается при контакте с инфицированной кровью). В 50-80% случаев гепатит С приводит к хроническому поражению печени.

Возбудитель гепатита C

Вирусный гепатит С (ВГС) вызывается РНК-содержащим вирусом (HCV), относящимся к семейству Флавивирусов (Flaviviridae). Вирус имеет липидную оболочку, сферическую форму, средний диаметр составляет 50 нм, нуклеокапсид содержит однонитевую линейную РНК В различных регионах Земли циркулируют разные генотипы вируса. Генотип не влияет на исход инфекции, но позволяет предсказать эффективность лечения.

Отличие этого вируса по сравнению с другими вирусами, поражающими печень, является его довольно быстрая мутационная изменчивость под воздействием лекарственных препаратов, других бактерий и вирусов, и многих других причин. Такая быстрая перемена приводит к тому, что вирус скрывается от иммунной системы, а при этом антитела (защитные элементы организма) не способны полностью уничтожить вирус. Это помогает длительному (возможно, пожизненному) пребыванию вируса гепатита С в организме человека. Ученые доказали, что вирус поражает не только клетки печени, но и клетки крови — лейкоциты.

Пути передачи гепатита C

Передача вируса гепатита С осуществляется через кровь, например, вследствие различных внутривенных вмешательств, через нестерильные медицинские инструменты, от серопозитивных матерей к плоду и т. д. Заражение может происходить:

• при переливании крови или ее препаратов,
• инъекционном употребление наркотических и других веществ (когда используется не одноразовые шприцы),
• в результате проведения медицинских манипуляций (когда не соблюдаются правила стерилизации медицинского инструмента),
• при бытовом контакте с инфицированной кровью (например при нанесении татуировок, ритуальных надрезов, при проведении пирсинга, маникюра, педикюра и т.д.)

Группами риска для заражения вирусным гепатитом С являются больные, которым переливали кровь, больные гемофилией и наркоманы. Также возможен и половой путь передачи, но он встречается значительно реже по сравнению с внутривенными процедурами. При большом числе половых партнёров вероятность заражения возрастает.

Симптомы и течение гепатита C

Отличительной особенностью гепатита С от других гепатитов является то, что по клиническому течению он протекает в основном стертыми формами течения болезни (безжелтушными), в отличие от вирусных гепатитов А и В, при которых одним из главным симптомов изначально является желтушное окрашивание кожных покровов. Только у одной трети инфицированных имеются какие-либо симптомы и даже они обычно маловыражены. У многих инфицированных людей симптомы могут не проявляться годами. Однако при этом повреждение печени все же происходит.

При гепатите С в основном жалобами являются общая слабость, повышенная утомляемость, незначительное повышение температуры тела. У некоторых людей возникают такие симптомы, как желтизна кожи и глаз. И именно появление желтухи приводит больного к врачу.

При обследовании (УЗИ) выявляется плотная и значительно увеличенная печень и селезенка. При этом самочувствие и клиническое состояние больного не соответствует степени поражения этих органов т.к. на фоне малосимптомной клинической картины довольно часто развивается злокачественное перерождение печени в цирроз. При циррозе соединительная ткань разрастается и замещает нормальную ткань, нарушая такие важные функции печени как пищеварение и детоксикацию. Цирроз развивается приблизительно у 20% людей, инфицированных вирусом гепатита С, причем такое перерождение клеток печени при гепатите С происходит значительно чаще, чем при других гепатитах. Именно поэтому медики называют вирусный гепатит С — «ласковый убийца».

Течение и осложнения гепатита C

При естественном течении ВГC 20–25% больных спонтанно выздоравливают, у остальных 75–80% происходит развитие хронической формы этого заболевания. Факторы, связанные со спонтанной элиминацией вируса: молодой возраст, женский пол и определённое сочетание генов главного комплекса гистосовместимости.

При затяжном течении в процесс болезни вовлекаются почки (гломерулонефрит), появляются различные кожные высыпания, возникают ревматоидные симптомы, накапливается жидкость в полостях, в основном, в брюшной (асцит). Прогрессирование заболевания гепатита С происходит крайне медленно. Хронический гепатит может развиваться более 10 лет после заражения, а цирроз (злокачественное перерождение клеток печени) — спустя несколько десятилетий. Отмечают, что скорость прогрессирования заболевания печени НЕ связана с имеющимися у человека генотипом вируса или количеством вирусов.

Эксперты выделяют несколько факторов, которые могут быть связаны с более быстрым прогрессированием заболевания:

• пожилой возраст на момент инфицирования
• мужской пол
• употребление алкоголя (вина, пива, крепких напитков)
• ко-инфекция вирусом гепатита В (HBV) или вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ)
• избыточный вес
• наличие диабета
• курение

Диагностика вирусного гепатита C

Диагностика вирусного гепатита С в первую очередь устанавливается на сборе анамнеза: заболевание гемофилией, проведение манипуляций, операций, употребление наркотических препаратов и других факторов. Диагноз подтверждается определением в крови больного специфических антител к вирусу гепатита С.

2) биохимическое исследование крови для определения активности ферментов – (АЛТ) и (АСТ); при наличие заболевания, их значения в несколько раз превышают установленные нормы.

5) пациентам, имеющим диагностические критерии хронического гепатита показана пункционная биопсия печени.

6) инструментальные исследования (УЗИ органов брюшной полости, рентгенография органов грудной клетки)

Лечение гепатита C

Лечение хронического гепатита C сегодня намного более успешно, чем еще десять лет назад. При хроническом гепатите С проводят противовирусную терапию, направленную на снижение вирусной нагрузки (подавление репликации вируса, уменьшение концентрации вируса в организме) и симптоматическую терапию, улучшающую качество жизни и поддерживающую функцию печени.

Притивовирусные препараты могут назначаться как в монотерапии, так и в сочетании с интерферонотерапией. В новых Международных рекомендациях по лечению хронического гепатита С, сказано, что пегилированный интерферон и рибавирин считаются стандартными препаратами для лечения заболевания.

Хорошую эффективность при лечении гепатитов показали новые российские противовирусные препараты, механизм действия которых основан на том, что они взаимодействует с мембранами клеток и конкурируют за рецепторы, с помощью которых происходит прикрепление и проникновение вирусов внутрь клетки. Их назначение, способствует выработке организмом собственного интерферона, который также обеспечивает защиту от вирусов.

Помимо противовирусной терапии осуществляют и симптоматическое лечение с назначением препаратов улучшающих кровообращение, гепатопротекторов, при необходимости проводится дезинтоксикационная терапия.

Гепатит С: какие анализы нужно сдать

Согласно эпидемиологическим данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), на 2017 год в мире насчитывается около 150 миллионов человек, которые были инфицированы вирусом гепатита С. Гепатит С — это опасное вирусное заболевание печени. Этот вирус может приводить к развитию как острой, так и хронической формы гепатита, которая варьируется по тяжести – от легкой болезни, продолжающейся несколько недель, до серьезной пожизненной болезни. При своевременной диагностике и правильно подобранном лечении данная патология полностью излечима, особенно, если не медлить со сдачей анализов на выявления гепатита С в крови. Иначе последствия могут быть трагическими — гепатит С часто приводит к развитию необратимых изменений, потенциально угрожающих для жизни.

Благодаря наличию в своих стенах современного медицинского оборудования, Юсуповская больница занимается диагностикой всех видов вирусных гепатитов. В клиники терапии каждому пациенту окажут не только квалифицированную помощь от специалистов высшей категории с многолетним стажем работы, но и понимание, поддержку в его нелегкой борьбе с ужасным заболеванием.

Гепатит С: что нужно знать пациенту

Гепатит С — один из самых коварных и смертельных вирусов. В 90% случаев протекают бессимптомно. Из-за способности маскировать истинную причину под видом множества других заболеваний, его прозвали «ласковый убийца». Если болезнь все-таки дала о себе знать, активная ее фаза делится на два основных периода: преджелтушный и желтушный. В первом (раннем) периоде отмечаются такие характерные для вирусных инфекций симптомы, как:

• общая слабость;
• кожный зуд;
• расстройства пищеварения: тошнота, рвота, диарея;
• повышение температуры тела до 38°С;
• головные боли, миалгия, артралгия.

На втором (желтушном) периоде, когда поражена печень, в кровь выбрасывает большое количество билирубина — желтого пигмента. Именно благодаря иктеричному окрашиванию кожных покровов пациента становится очевидно, что у него присутствуют явные проблемы с печенью, и назначается комплекс лабораторных исследований крови, мочи и кала.

Однако многие случаи заражения протекают бессимптомно, без характерной клинической картины. После инкубационного периода, который длиться от пары недель до пары месяцев, пациент может и не подозревать, что он является носителем вируса не только в продромальной (преджелтушной) стадии, но и в желтушной — по причине отсутствия ее как таковой. Например, в 2/3 всех случаев гепатит С проходит в атипичной (безжелтушной, или субклинической) форме.

Анализ гепатит С: особенности и подготовка

Всегда кровь на биохимический анализ сдается строго натощак, непосредственно в утренние часы, до полудня. Это обусловлено суточными ритмами в организме человека, которые влияют на содержание гормонов в крови. Количественный анализ на гепатит С (антигены и антитела) сдается в любое время суток, но тоже, обязательно, натощак: важно не принимать пищу в течение 4–6 часов до забора крови. В обоих случаях используется венозная кровь, которая как биоматериал более качественна, чем капиллярная либо артериальная.

Накануне сдачи любых анализов крови рекомендуется избегать чрезмерных физических и психоэмоциональных нагрузок, приема алкоголя и тяжелой пищи. Питьевой режим должен быть обычным.

Количественные и качественные анализы на гепатит С

Этот вид гепатита имеет шесть разновидностей, поэтому анализы необходимо проводить в комплексе. К группе риска относятся люди, принимающие внутривенные наркотики (кокаин, героин), ведущие беспорядочную половую жизнь, медработники (особенно хирурги и анестезиологи), а также пациенты, которым показаны гемодиализ или переливания крови.

В профилактических целях либо при подозрении вирусное поражение печени сдаются следующий качественный и количественный анализ на гепатит С:

• Анализ на anti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C). Качественный анализ. Положительный результат означает инфицирование или период восстановления после перенесенной инфекции. Отрицательный результат — инкубационный период;
• Определение РНК (HCV-RNA) в сыворотке или плазме крови. Может быть качественным и количественным. При качественном анализе результат «обнаружено» подтверждает заражение гепатитом C. Отрицательный результат говорит об отсутствии вируса в крови пациента;

При количественном анализе плазмы крови на гепатит С:

• «не обнаружено»: РНК гепатита С не выявлена;
• 100 000 000 МЕ/мл: результат интерпретируется как: «РНК гепатита С выходит за пределы линейного диапазона, тест ставился в разведении 1: Х».

При количественном анализе сыворотки крови на гепатит С:

• «не обнаружено»: РНК гепатита С не выявлена;
• 2 до 10 8 МЕ/мл: результат положительный;
• 10 8 МЕ/мл: результат положительный, концентрация РНК гепатита С более 108 МЕ/мл.
• Определение антител IgG (recomBlot HCV IgG). Качественный тест. Отрицательный результат говорит об отсутствии инфицирования. Положительный результат — пациент был инфицирован ранее. Сомнительный результат — возможно, была инфекция.

Расшифровка анализа крови на гепатит С

Расшифровка анализа крови на гепатит С и верификация диагноза, с учетом клинической и эпидемиологической картины, под силу только специалисту.

При отрицательном результате в крови, по итогам всех проведенных тестов, не находят никаких маркеров вирусного гепатита. Тогда можно говорить об отсутствии заболевания. Однако в некоторых случаях врачи рекомендуют сделать анализы повторно через две недели.

При положительном результате анализа на гепатит проводится повторный уточняющий анализ через две-три недели. Возможен вариант, когда пациент только что переболел острой формой вирусного гепатита и маркёры в крови пока еще сохраняются.

Анализ на гепатит С: цена, Москва

Стоимость анализа на гепатит С в частных клиниках Москвы варьируется в диапазоне от 500-2000 рублей. Качественный анализ на гепатит С стоит в среднем 700 рублей. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР обойдется жителям Москвы примерно в 2500 рублей.

Юсуповская больница специализируется на диагностике и проведении анализов на выявление всех типов вирусных гепатитов. В стационаре клиники работает собственная современная лаборатория, сотрудники которой постоянно усовершенствуются в своей профессии и проходят специальные курсы по повышению квалификации. В больнице разрабатывают новые медикаментозные методики лечения различных видов вирусных гепатитом, в том числе и гепатит С. Ответственность перед каждым пациентом и высокий уровень профессионализма сотрудников – это визитная карточка Юсуповской больницы. Для записи на прием, звоните по телефону.

Когда и как нужно провериться на сифилис. Как узнать время заражения

Врач гинеколог-онколог. Руководитель сети Университетских клиник. Эксперт по патологиям вульвы и шейки матки, ведущий консультирующий врач в Центре патологии шейки матки в Санкт-Петербурге. Стаж 20+ лет. Принимает в Университетской клинике. Стоимость приема 2500 руб.

• Запись опубликована: 08.04.2019
• Reading time: 3 минут чтения

Понятие «звездная болезнь» в начале XX века было связано далеко не со знаменитостями. Так в те годы называли сифилис. При этом заболевании на теле появляется мелкая сыпь, похожая на звёздочки. Болезнь даже была описана в рассказе М. Булгакова «Звездная пыль».

Ситуаций, характерных для начала прошлого века, когда сифилисом болели целые деревни, сейчас уже нет. Но это не значит, что заболевание кануло в Лету.

Как возникает сифилис и легко ли им заразиться

Помните шутку, когда в анализах нашли только спирохету, и то какую-то бледную. Действительно, сифилис вызывается бледной трепонемой, относящейся к роду спирохет. Однако этот микроорганизм, называемый на латыни Treponema pallidum, шутить не любит, приводя к серьезным осложнениям. В отличие от других возбудителей венерических заболеваний, он передается не только половым, но и бытовым способом. Поэтому подхватить болезнь можно при обычном контакте.

Чаще всего бытовой формой заражаются дети, но ее могут подхватить и взрослые. Заражение происходит при пользовании общей посудой, предметами обихода, бельем. Подцепить инфекцию можно даже в парикмахерской, маникюрном или тату-салоне, если там не сильно «заморачиваются» гигиеной и стерилизацией.

Инфекция, которая бушевала в 90 годах и позже, пошла на спад, сейчас опять подняла голову и грозит практически любому. Трепонема живёт и процветает, в частности, благодаря наплыву нелегальных трудовых мигрантов, состояние здоровья которых иногда не проверялось по многу лет. Больной не только губит свое здоровье, но и становится источником заражения для окружающих – коллег, членов семьи.

Симптомы заболевания. Когда лучше остаться с носом

Болезнь начинается примерно через 3-6 недель после заражения. На коже или слизистой появляется твердый шанкр – язва с плотным дном и плотными приподнятыми краями, напоминающими валик. Размеры ее могут быть разными – от 3 мм до 4 см. Иногда возникают два шанкра на разных частях тела. Появление язв сопровождается увеличением лимфоузлов.

Образование не болит, что отличает его от других изъязвлений. Поэтому первое, что должно насторожить – появление странного, долго не проходящего, плотного безболезненного очага, сопровождающегося увеличением лимфоузлов.

Иногда язвы возникают не на коже и слизистой, а в женских половых путях или прямой кишке. В этом случае они выдают себя болями, выделениями из влагалища и появлением крови при дефекации. Шанкр может появиться и в глотке, вызывая охриплость голоса и другие симптомы, похожие на ангину или ларингит.

Любые выделения из половых путей и боль при дефекации должны стать причиной обращения к гинекологу или проктологу. Врач проведет осмотр и при необходимости направит на анализ.

Даже при отсутствии лечения язвочки постепенно затягиваются. Но это не значит, что болезнь прошла. Примерно через 10 дней начинается вторичный период – на теле появляется обильная бледно-розовая сыпь, похожая на звёздное небо. Снова увеличиваются лимфоузлы. В паховой области появляются наросты – широкие кондиломы, в которых содержится возбудитель. В отличие от остроконечных кондилом, эти наросты имеют более темный цвет, а при надавливании выделяют жидкость.

Высыпания на теле и половых органах, особенно сопровождающиеся увеличением лимфоузлов, – повод провериться на это заболевание.

Если проигнорировать симптомы и не начать лечиться, возникнет третичная форма болезни с поражением нервов, костей, выпадением волос, появлением незаживающих язв. Часто при этом разрушаются носовые кости. У пациента проваливается переносица и возникает «нос бульдога» – типичный признак запущенной болезни.

Заражение во время беременности приводит к рождению больных детей, которые часто умирают в первые дни или месяцы жизни.

Нужно ли сдавать анализ при отсутствии симптомов

Поскольку заболевание очень опасно, на него нужно периодически проверяться даже при отсутствии симптомов. Анализ проводится:

• При возможности заражения, например, при сомнительных половых отношениях или обнаружении болезни у контактных лиц.
• На этапе подготовки к оперативным вмешательствам.
• При планировании беременности .
• При проведении медосмотров и профилактическом обследовании сотрудников, работающих с пищевыми продуктами и обслуживающих население.
• При всех видах донорства.

Подготовка к анализам

Диагностика проводится строго натощак. За 30 минут до проведения диагностики нельзя курить. Других ограничений для проведения процедуры нет. Для большинства исследований берется кровь из вены, но при некоторых методиках она может браться и из пальца.

Методы обнаружения болезни

Микрореакция, RPR-реакция – современный вариант известной реакции Вассермана. Это быстрый и простой метод, применяемый при профилактических осмотрах и других случаях первичной диагностики.

Анализ достаточно точен, но иногда дает ложноположительные реакции, связанные с особенностями организма пациента и сопутствующими болезнями. В этом случае результат перепроверяется с помощью других методик.

ПЦР-реакция находит трепонем по участкам их генного материала. Метод позволяет обнаружить спирохеты даже при небольшой их концентрации. Анализ практически не дает ложноположительных и ложноотрицательных результатов, поскольку реактивы, применяемые для его проведения, срабатывают только на этого возбудителя.

Иммуноферментный метод (ИФА), основанный на обнаружении антител к трепонеме. Любой микроорганизм, в том числе и возбудитель сифилиса, является чужеродным для организма, поэтому иммунная система в ответ на его внедрение выделяет особые белковые соединения – антитела:

• Иммуноглобулины класса М (IgM), первыми вступающие в борьбу с непрошенными «гостями».
• Иммуноглобулины класса G (IgG), выделяющиеся позже – в разгар болезни.

ИФА-метод применяется в качестве уточняющего при положительной микрореакции, а также при исследовании контактных лиц и доноров. Однако его можно использовать и в качестве первичного анализа.

Соединяясь с антигенами трепонем, они образуют структуры, которые и обнаруживаются в анализе. При проведении анализа можно определить не только наличие антител, но и их концентрацию, зарегистрировав ее рост или снижение. Для этого придется обследоваться несколько раз.

Определение примерного времени заражения по концентрации IgM и IgG

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) – методика, при которой также выявляются антитела в сыворотке крови. Для этого используются специальные реактивы на основе бараньих эритроцитов, реагирующие на антитела (IgM) (IgG), вырабатываемые организмом при сифилисе.

При обнаружении возбудителей образец становится темно-красным за счет склеивания красных кровяных телец. Тестирование имеет 96-100% точность. Ошибки случаются при тяжелых инфекциях и системных заболеваниях типа красной волчанки. В этом случае результат проверяется с помощью других методик.

РПГА и ИФА-анализы, основанные на исследовании плазмы крови, дают результаты даже до появления первых симптомов болезни. Их также применяют для контроля излеченности.

Поскольку разные виды антител появляются на разных этапах развития инфекции, определив концентрацию IgM и IgG, можно узнать примерно, когда произошло заражение.

При любых подозрениях на возможность заражения сифилисом лучше перестраховаться и сдать анализы. Лабораторная диагностика позволит вовремя выявить инфекцию и пролечиться, избежав тяжелых осложнений.

Причины ложноположительного результата на ВИЧ, как избежать ошибки

Причины ложноположительного результата на ВИЧ, как избежать ошибки

Названы причины ложноположительных результатов ВИЧ-тестирования. Приводимые сведения порождают полное недоверие к этим тестам.

«Ложноположительные результаты на вирус иммунодефицита встречаются довольно часто, буквально повергая в шок человека, сдающего кровь. Дело все в том, что существует масса заболеваний, которые могут спровоцировать ложноположительный результат.
Причины, по которым результат может стать ложноположительным, причем неважно анонимный он или нет — нарушения правил сдачи крови. Обычные семечки или предварительно употрeбленные в пищу острые, кислые, жареные продукты, и даже минеральная газированная вода, особенно щелочная — например, боржоми, могут спровоцировать сомнительный результат, неважно, сколько их съедено — много или мало.

Состояния, которые могут спровоцировать ложноположительный результат:

перекрестные реакции;
период беременности (группа риска — несколько раз рожавшие женщины);
наличие нормальных рибонуклеопротеинов;
многократная сдача донорами крови;
инфекционные поражения дыхательной системы;
вирус гриппа и гепатита;
недавно сделанные прививки (столбняк, гепатит В, грипп);
очень густая кровь;
первичные аутоиммунные заболевания печени;
туберкулез;
вирус гepпeса;
плохая свертываемость;
лихорадка;
заболевания печени, вызванные алкоголем;
артрит;
нарушение иммунорегуляторных процессов;
поражение мелких сосудов организма;
онкологические заболевания;
разные виды склероза;
пересадка органов;
повышенный билирубин;
повышенный уровень антител;
критические дни.

Некоторые заболевания могут стать причиной перекрестных реакций. Например, из-за аллергии в крови могут выpaбатываться непонятные для организма антигены, которые он распознает как чужеродные. Такие антигены могут стать причиной ложноположительного результата.

В период беременности у женщины происходит гормональный сбой, поэтому в некоторых случаях может быть ложноположительный результат на сдаче анализа. При мeнcтpуальном цикле кровь на вирус иммунодефицита не рекомендуется сдавать.

Любые инфекционные, грибковые и вирусные заболевания практически всегда дают положительный результат на наличие вируса иммунодефицита. По этой причине врачи советуют пройти лечение болезни, и лишь спустя 25-30 дней пройти обследование.

Заболевания, онкология, повышенный показатель билирубина, прививки — все эти факторы влияют на результат. Если в крови присутствует нестандартный набор ферментов, то анонимный анализ будет ложноположительным.

По этим причинам, доктора не сообщают людям, что у них уже диагностирована вирусная инфекция иммунодефицита. И услышав о том, что анализ положительный, человек в первую очередь должен задуматься о том, что могло спровоцировать положительный результат.

Очень часты ложноположительные результаты анализов на вирус иммунодефицита человека после трaнcплантации органов, особенно в период, когда орган приживается. В этом случае выpaбатываются неизвестные антитела, которые при сдаче анализа кодируются как антигены вируса иммунодефицита.

Перед сдачей анонимного анализа на ВИЧ или СПИД, нужно обязательно оповестить врача о том, присутствует ли заболевание и сколько оно длится. Сделать это нужно для того, чтобы исключить ложноположительный анализ.

Даже если анализ оказался положительным, не нужно впадать в панику, возможно, он ложноположительный..

Столь внушительный список причин ложноположительных реакций ВИЧ-тестов, публикуемый на сайте 101анализ.ру, порождает уже полное недоверие к этим тестам. И стоит обратить внимание на то, кто и как часто оказывается ВИЧ-положительным.

Но прежде всего нужно обратить внимание на то, что сама ВИЧ/СПИД-теория изначально построена на той недоказанной гипотезе, что именно ВИЧ-вирус, якобы вызывающий иммунодефицит, соответственно и является первопричиной развития СПИД-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-положительных. Поэтому если у пациента развилось такое заболевание, и при тестировании на ВИЧ он оказывается ВИЧ-положительным, то в соответствии с этой теорией и с инструкциями спидологи просто автоматически ставят такому пациенту диагноз ВИЧ-инфекция, причём уже в стадии СПИД, то есть развития СПИД-ассоциированного заболевания.

И если у пациента есть симптомы или заболевания из нижеследующего списка, то для спидологов они не являются сигналом к тому, что при их наличии тест на ВИЧ может оказаться ложноположительным — совсем наоборот! — для них они являются как раз прямым и узаконенным поводом для тестирования такого пациента на ВИЧ, и одним из «доказательств» его «заражения».

1. Больные по клиническим показаниям:
— лихорадящие более 1 месяца;
— имеющие увеличение лимфоузлов двух и более групп свыше 1 месяца;
— с диареей, длящейся более 1 месяца;
— с необъяснимой потерей массы тела на 10 и более процентов;
— с затяжными и рецидивирующими пневмониями или пневмониями, не поддающимися обычной терапии;
— с затяжными и рецидивирующими гнойно — бактериальными, паразитарными заболеваниями, сепсисом;
— с подострым энцефалитом и слабоумием у ранее здоровых лиц;
— с ворсистой лейкоплакией языка;
— с рецидивирующей пиодермией;
— женщины с хроническими воспалительными заболеваниями женской репродуктивной системы неясной этиологии;

2. Больные с подозрением или подтвержденным диагнозом:
— наркомания (с парентеральным путем введения наркотиков);
— заболевания, передающиеся пoлoвым путем;
— саркомы Капоши;
— лимфомы мозга;
— Т-клеточного лейкоза;
— легочного и внелегочного туберкулеза;
— гепатита В, Hbs-антигеноносительства (при постановке диагноза и через 6 месяцев);
— заболевания, обусловленного цитомегаловирусом;
— генерализованной или хронической формы инфекции, обусловленной вирусом простого гepпeса;
— рецидивирующего опоясывающего лишая у лиц моложе 60 лет;
— мононуклеоза (через 3 месяца после начала заболевания);
— пневмоцистоза (пневмонии);
— токсоплазмоза (центральной нервной системы);
— криптококкоза (внелегочного);
— криптоспоридиоза;
— изоспороза;
— гистоплазмоза;
— стронгилоидоза;
— кандидоза пищевода, бронхов, трахеи или легких;
— глубоких микозов;
— атипичных микробактериозов;
— прогрессирующей многоочаговой лейкоэнцефалопатии;
— анемии различного генеза.

Сравните список причин ложноположительных реакций с перечнем клинических показаний к проведению ВИЧ-тестирования (а фактически СПИД-ассоциированных заболеваний и приписываемых ВИЧ-инфекции симптомов), и Вы обнаружите, что некоторые пункты одинаковые, такие как лихорадка, туберкулёз, гepпeс, гепатит, иные инфекции и онкологические заболевания.

Таким образом, получается, что с одной стороны, согласно ВИЧ/СПИД-теории, развитие всех этих заболеваний и симптомов у ВИЧ-положительных обьясняется прогрессированием ВИЧ-инфекции, будто она является их первопричиной, и при их наличии можно ставить диагноз ВИЧ/СПИД буквально автоматически, а с другой стороны, утверждается практически прямо противоположное — все эти факторы сами по себе могут быть причиной ложноположительной реакции при тестировании на ВИЧ, и поэтому при их наличии это тестирование нельзя считать достоверным.

Противоречие между этими подходами, как видите, принципиальное, и можно сказать неразрешимое в том смысле, что сама ВИЧ/СПИД-теория изначально на том и построена, что ВИЧ приводит к развитию СПИД-ассоциированных заболеваний, в частности инфекционных, поскольку они и сопровождаются снижением иммунитета, и в рамках этой теории само обсуждение того, что наличие таких заболеваний само по себе может являться причиной положительной реакции ВИЧ-тестов, является мягко говоря недопустимым, поскольку полностью противоречит этой теории и ставит её под большое сомнение.

Сами посудите: если сам диагноз ВИЧ-инфекция ставится в том числе именно по наличию клинических признаков, то есть наличию СПИД-ассоциированных заболеваний и симптомов, и это закреплено в теории и практике, то отказаться от всего этого, и фактически прекратить обследование на ВИЧ по клиническим показаниям — для СПИД-индустрии это можно сказать акт самоубийства, признания полной несостоятельности ВИЧ/СПИД-теории. Ведь она сразу потеряет всякий смысл, если отменить ВИЧ-тестирование по клиническим показаниям, признав эти самые показания ни чем иным, как именно причинами, вызывающими ложноположительные результаты ВИЧ-тестов.

Причины ложноположительного результата на ВИЧ, как избежать ошибки

Ложноположительный анализ на ВИЧ – это ошибочный результат лабораторного исследования забранной венозной крови, при котором вирус иммунодефицита отсутствует в организме пациента, но диагностические методы дают положительный ответ.

Ни один тест или диагностическая методика не позволяют получить 100% достоверного результата. Для постановки окончательного диагноза принимаются во внимание сведения нескольких исследований (например, ИФА и иммуноблоттинга).

Допущение ошибки и постановка неверного диагноза ВИЧ может привести к необратимым последствиям. Назначаемая высокоактивная антиретровирусная терапия (ВААРТ) провоцирует серьезные побочные эффекты и способна вызвать дисфункцию некоторых внутренних органов.

Повторно пройденный тест – возможность избежать неведения и поставить точку в вопросе определения диагноза. Даже если вирус будет обнаружен, вы сможете своевременно начать лечение и прожить полноценную жизнь.

Вероятность ошибки по сообщениям специалистов составляет всего 0,01%, однако в действительности это значение гораздо выше. Предлагаем рассмотреть причины ложноположительного результата и узнать правила, позволяющие свести его получение к минимуму.

Причины ложноположительного анализа

Ложноположительный анализ на ВИЧ довольно часто встречается среди беременных женщин (особая группа риска – женщины, рожавшие несколько раз!). Причиной является серьезный сбой гормонального фона в период беременности.

Читать еще:  Причины возникновения аллергии во время беременности

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ:

• перекрестные аллергические реакции,
• недавние прививки,
• воспаление мелких сосудов организма,
• вирус гепатита или гриппа,
• трaнcплантация внутренних органов,
• онкологические болезни,
• повышенный билирубин,
• склероз (различные формы),
• плохая свертываемость или повышенная густота крови,
• аутоиммунные болезни печени,
• туберкулез,
• мeнcтpуация,
• любые инфекционные заболевания.

Внимание! Перед сдачей анализа на ВИЧ рекомендуется сообщить врачу о состоянии беременности, операциях и иных манипуляциях, проведенных за последние 3-4 месяца.

Получение ложноположительного результата может быть обусловлено «человеческим фактором» (например, ошибка при проведении анализа или ведении документации, перепyтaнные пробирки, неправильная маркировка).

Любое инфекционное или вирусное заболевание способно привести к ложноположительному результату. Сдавать анализы рекомендуется через 35-40 дней после выздоровления, чтобы быть уверенным в постановке диагноза.

Ложноположительный результат у беременных женщин

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ у беременных женщин, за исключением гормонального сбоя, подразделяются на 2 группы:

• Синтез мужских и женских генетических материалов (объединение яйцеклетки и cпepматозоида) при зарождении в организме новой жизни, приводящий к образованию ДНК.

Реагируя на происходящие изменения и чужеродную ДНК, у женщины выpaбатываются собственные антитела. При тестировании на ВИЧ они приведут к получению ложноположительного результата.

• Стрессовое состояние, в котором пребывает беременная женщина. Вероятность возрастает при наличии психологических проблем, возникших до беременности.

Женщины сдают анализ на ВИЧ несколько раз в продолжение всей беременности. Своевременное выявление инфекции позволит предпринять ряд мер, чтобы обезопасить младенца и не допустить его инфицирования в период родов или лактации.

Об основных правилах процедуры у ВИЧ-инфицированных

Первый анализ ИФА на выявление антител проводится через 6-12 недель с момента предполагаемого заражения. В период инкубационного окна результат будет отрицательным (ложноотрицательным) либо сомнительным.

Основные правила проведения процедуры у ВИЧ-положительных:

• Если человек инфицирован, то общий анализ крови ему необходимо сдавать раз в квартал. Подобная мера позволит специалисту отслеживать динамику прогрессирования заболевания, составлять и корректировать лечебный процесс;
• Чтобы получить максимально корректные результаты, рекомендуется создать одинаковые условия для забора венозной крови. Для более точных исследований проводите процедуру в одной и той же специализированной лаборатории;
• Сдача крови на анализы для выявления антител, выработанных по отношению к ВИЧ, рекомендована в утреннее время. Обусловлено это тем, что в утренние часы у человека повышается уровень эритроцитов.

Консультацию по вопросам проведения процедуры по забору венозной крови у пациентов, подготовке и расшифровке результатов вы можете в частной или государственной поликлинике, а также специализированном центре по борьбе со СПИДом.

Как правильно пройти тест

Портативные тесты для выявления антител к ВИЧ в домашних условиях – быстрый и простой способ узнать о наличии инфекции. Широко применяются наборы для исследования мочи, крови и слюны без обращения к специалистам.

Недостаток экспресс-тестирования состоит в высокой вероятности ошибки по сравнению с остальными диагностическими методиками. Не имея медицинского образования, люди неправильно используют или расшифровывают результаты, что приводит к получению ложноположительного диагноза.

Частота ложноположительного результата при использовании экспресс-тестирования достигает 1%. Полученного после первого исследования результата недостаточно для постановки верного и окончательного диагноза.

Как пройти тест? Исследуемую биологическую жидкость (в зависимости от выбранного набора) поместите в специальный контейнер, содержащий реагент. Подождите 15-20 минут для получения результата исследования.

Современные портативные тесты дают 3 варианта:

Получение сомнительного результата обычно происходит в инкубационный период, когда размножение вируса только начинается и уровень антител сравнительно невысокий. Для постановки окончательного диагноза обратитесь в специализированную лабораторию.

Подготовка к правильной сдаче анализа

Лабораторные исследования, направленные на выявление антител к вирусу иммунодефицита человека, проводятся натощак – между последним приемом пищи и забором венозной крови должно пройти не менее 8 часов.

Подготовка к сдаче анализов на ВИЧ подразумевает:

• Особый питьевой режим – разрешается употрeбление только простой негазированной воды. Исключите из рациона за 8 часов чай, кофе, сахаросодержащие, алкогольные и иные напитки;
• Рацион питания – отказ от жареной, жирной и острой пищи за сутки до лабораторного исследования на ВИЧ;
• Противопоказаны стрессовые ситуации, физическое переутомление, травмы и употрeбление антибиотиков.

Придерживаясь вышеперечисленных правил, удастся обеспечить максимальную точность результатов лабораторных исследований.

Диагностирование ВИЧ в лаборатории

Положительные анализы на ВИЧ, проведенные в специализированных лабораторных условиях, являются единственным основанием для постановки диагноза. Процедypa проводится анонимно или открыто, по времени забор венозной крови занимает не более 20 минут.

Внимание! Сдавать анализ на ВИЧ необходимо при любом подозрении на инфицирование (например, при незащищенном пoлoвoм контакте с незнакомым партнером или использовании нестерильных медицинских инструментов).

Этапы диагностирования ВИЧ:

1. ИФА (иммуноферментный анализ). Определяет наличие антител, выpaбатываемых иммунной системой в ответ на вирус. Фактически анализ «сортирует» однозначно здоровые и подозрительные клетки. На этом этапе вероятность получения ложного результата велика.
2. Иммуноблоттинг. На наличие антител изучается сыворотка, получаемая при выделении плазмы и эритроцитов из венозной крови. Более эффективная диагностическая методика в сравнении с ИФА, но не безукоризненная.
3. ПЦР. Проверка сыворотки крови, оценка уровня CD₄-лимфоцитов. Эффективный способ, используемый в частности для выявления ВИЧ у малышей с первого года жизни. Преимущество – выявление вируса на раннем периоде до образования антител.

Анализы проводятся не друг за другом, а спустя определенный промежуток времени (например, 2-3 недели с момента предыдущего исследования).

Расшифровка результатов

Результаты различных диагностических методик будут отличаться, но при выявлении трех основных наборов белков специалист ставит положительный диагноз.

Результаты забора и исследования венозной крови на ВИЧ:

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ

Большинство людей, сдающих, в силу разных причин, анализ на ВИЧ, всегда надеются на отрицательные показатели. Но иногда бывает, что у неинфицированного человека результат оказывается положительным, что заставляет немало поволноваться. Почему же возникают недостоверные результаты, и как их избежать?

Обнаружение инфицирования можно провести двумя способами:

• Определение антител методом иммуноферментного анализа (ИФА). В ходе исследования происходит сортировка антител на заведомо здоровые и подозрительные, появление которых может исказить результаты.
• Иммуноблотинг – более тщательный и достоверный метод. Заключается в разделении смеси антигенов с помощью электрофореза в специальном геле. Затем пластинку с гелем обpaбатывают сывороткой, содержащей антитела к вирусу. Далее анализ продолжают методом ИФА.

Если пациент желает, то может сдать кровь на ВИЧ анонимно. Данные анализа обpaбатываются в течение 3 недель.

Стоит внести некоторую ясность в терминологию. СПИД, или синдром приобретенного иммунодефицита, — терминальная стадия ВИЧ-инфекции, заканчивающаяся cмepтью. Лечения от этой болезни, к сожалению, на сегодняшний день не существует. А вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) – это причина, вызывающая СПИД. Поэтому, как таковой, анализ на СПИД не сдается, а диагноз ставится на основании положительного теста на ВИЧ и соответствующей клинической картины.

И все же искаженный результат может возникнуть при наличии следующих заболеваний:

• аутоиммунные заболевания печени;
• патология иммунной системы;
• хронические артриты;
• наличие различной вирусной инфекции;
• онкологические заболевания;
• нарушения свертываемости крови.

Доноры крови также часто сталкиваются с неверным результатом, из-за постоянного обновления крови при частой сдачи.

Следует помнить, что диагноз ВИЧ-инфекции никогда не устанавливается по одному анализу. В случае получения положительных тестов нужно пересдать анализ примерно через 3 месяца. При отсутствии инфицирования новый анализ на вирусы должен показать отрицательный результат.

Существует тест-системы, позволяющие проводить анализ дома. По статистике именно они чаще всего показывают ложноположительные результаты. Для этого есть ряд причин:

• ненадлежащее хранение и эксплуатация тест-системы;
• несоблюдение стерильности при заборе материала;
• нарушение техники проведения анализа;
• сопутствующие состояния организма (вредные привычки, неправильное питание);
• завершение срока годности системы.

Несомненным плюсом применения домашних тестов является сохранение анонимности.
Нередкая ситуация, когда положительный результат обнаруживается у беременных женщин. Это объясняется тем, что в ответ на имплантацию женский организм начинает выpaбатывать антитела, воспринимая эмбрион как чужеродный материал. Отсюда и неверные показатели теста.

Если у беременной женщины пришел положительный анализ, врачу нужно быть крайне тактичным, чтобы сообщить эту неприятную новость. Желательно пересдать анализ в специализированных СПИД-центрах.

Не стоит забывать и о человеческом факторе. Случаи, когда анализы перепутали, не часто, но имеют место быть. Чтобы это не происходило, медицинскому персоналу нужно более ответственно подходить к выполнению своих обязанностей.

Читать еще:  ВИЧ симптомы, классификация и распознавание

Чтобы избежать ложноположительного результата, при сдаче крови нужно соблюдать ряд правил:

• За несколько дней до сдачи крови нельзя курить, принимать алкоголь, вести активную пoлoвую жизнь, неправильно питаться.
• Недавно перенесенное инфекционное заболевания служит поводом для переноса сдачи анализа в среднем на месяц.
• Также необходимо учитывать прием лекарственных препаратов, которые тоже могут исказить результаты.

В любом случае, положительный анализ – еще не приговор. А чтобы его избежать, нужно соблюдать меры безопасности и заботиться о своем здоровье.

Ложноположительный анализ на ВИЧ: причины, расшифровка результатов

Ни одно медицинское тестирование на сегодняшний момент не позволяет получить абсолютно достоверный результат. Для подтверждения окончательного диагноза необходимо принимать во внимание информацию нескольких лабораторных исследований. Это касается даже сложных исследований биоматериала больного, таких как серологические методы, ПЦР и прочие. Особенно тяжелым с психологической точки зрения оказывается ложноположительный анализ на ВИЧ. Что может повлиять на такой результат? Что должен делать пациент, получивший подобную распечатку исследования своей крови? Все ответы в нашей статье.

Последствия ошибки

Ложноположительный анализ на ВИЧ и допущение ошибки может приводить к множеству необратимых последствий. Например, назначаемое при данном заболевании высокоактивное антиретровирусное лечение провоцирует развитие серьезных побочных эффектов и способно вызвать нарушение функционирования внутренних органов.

Мopaльный аспект не менее тяжелый. Человек может потерять семью, друзей, любимых людей, даже желание жить.

Рассмотрим, что нужно предпринять при получении ложноположительного результата анализа на ВИЧ.

Повторный тест

Исследование крови, проведенное повторно, является единственной возможностью избежать ошибки и поставить точку при определении диагноза. Если при проведении повторного исследования вирус будет обнаружен, пациенту не остается ничего другого, только смириться с суровой действительностью и незамедлительно начать лечение.

Вероятность ошибки, согласно статистическим данным, составляет приблизительно 0,01%, однако в действительности данный показатель гораздо выше.

Ложноположительный анализ на ВИЧ достаточно часто наблюдаются у женщин во время беременности. В особой группе риска находятся дамы, у которых было несколько родов. Такое явление возникает из-за серьезного нарушения гормонального фона в период вынашивания ребенка.

Причинами ложноположительного анализа на ВИЧ у мужчин являются:

• Аллергические реакции перекрестного типа.
• Недавно сделанные прививки.
• Присутствие в организме вируса гриппа или гепатита на момент проведения исследования.
• Воспаление мелких сосудов в организме.
• Трансплантация внутренних органов.
• Повышенная концентрация билирубина в крови.
• Онкологические заболевания.
• Различные формы склероза.
• Повышенная густота или плохая свертываемость крови.
• Аутоиммунные патологии печени.
• Туберкулез.
• Любые инфекционные заболевания.

У женщин к данному списку следует добавить период мeнcтpуальных кровотечений.

Перед прохождением исследования рекомендуется сообщить специалисту о наличии беременности, проведенных операциях и прочих манипуляциях, которые присутствовали в последние несколько месяцев.

Человеческий фактор

Одной из причин ложноположительного анализа на ВИЧ может стать тривиальный человеческий фактор, который никто пока не отменял. Речь идет об элементарной ошибке лаборанта непосредственно при проведении исследования или при ведении документации. Имеют место даже случаи, когда медработник перепутывал пробирки или неправильно ставил на них маркировку.

Любое вирусное или инфекционное заболевание способно приводить к ложноположительному анализу на ВИЧ. Иногда человек не подозревает, что в его организме присутствуют другие вирусы (кроме ВИЧ), например, у него протекает инкубационный период какого-либо заболевания. В таком случае результат теста может быть неправильным. Также бывают ситуации, когда человек болел, например, гриппом, лечился. Симптомов у него больше нет, но он еще не выздоровел. Если в этот период сдать анализ на ВИЧ, результат может быть ложноположительным. Проводить подобные лабораторные исследования рекомендуется только спустя полтора месяца после выздоровления. Это поможет быть уверенным в постановке адекватного диагноза.

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ у женщин имеют свои нюансы. У представительниц слабого пола организм устроен невероятно сложно. Работа некоторых его систем может преподносить нежелательные сюрпризы.

Беременность

Факторы получения ложноположительного анализа на ВИЧ на этапе беременности у женщин (за исключением протекающих гормональных изменений) подразделяются на две основные категории:

1. Синтез женских и мужских генетических биоматериалов (объединение cпepматозоида и яйцеклетки) при зарождении новой жизни в организме, что приводит к образованию чужеродной ДНК. Реагируя на подобные изменения, Иммунная система начинает выpaбатываться собственные антитела. При проведении тестирования это может привести к получению ложноположительному анализу на ВИЧ у беременных.
2. Стрессовое состояние, которое часто наблюдается у дам в период вынашивания ребенка. Вероятность ложноположительного анализа на ВИЧ при беременности возрастает при наличии множественных психологических проблем.

Женщины в этот период проходят исследование несколько раз на протяжении всех девяти месяцев развития плода. Своевременное выявление данной инфекции помогает предпринять целый ряд мер, которые необходимы для того, чтобы обезопасить будущего малыша и не допустить его инфицирования в процессе родов или грудного вскармливания.

О причинах ложноположительного анализа на ВИЧ у мужчин и женщин лучше знать заранее, чтобы потом не паниковать.

Основные правила проведения лабораторных исследований

Анализ ИФА считается наиболее точным. Его погрешность составляет до 1%, но проводят данное исследование через 6-12 недель со дня предполагаемого заражения. В инкубационный период результат будет получен отрицательный (ложноотрицательный) либо сомнительный.

ПЦР можно проводить уже через 10-14 дней после возможного заражения, но точность этого анализа составляет всего 80-85%. Поэтому при получении положительного ответа пациенту назначают дополнительные исследования.

В перечень основных правил проведения процедуры анализа у ВИЧ-инфицированных больных входят:

1. Если человек заражен ВИЧ, то ему необходимо один раз в три месяца сдавать общий анализ крови. Подобная мера позволяет специалисту отследить динамику прогрессирования патологического процесса, корректировать и составлять терапевтические схемы.
2. Для получения максимально корректных результатов при заборе венозной крови необходимо создать одинаковые условия. Для большей точности исследований процедуру необходимо проводить в одной и той же специализированной медицинской лаборатории.
3. Сдача крови для выявления антител, выpaбатываемых организмом по отношению к ВИЧ, проводится в утреннее время. Это обусловлено тем, что в начале дня у людей увеличивается концентрация эритроцитов.

Консультацию по вопросам осуществления процедуры по забору крови, подготовке и расшифровке результатов исследований можно получить в государственной или частной поликлинике, а также специализированных центрах по борьбе со СПИДом.

Экспресс-тестирование

Портативные тесты для определения антител к ВИЧ в домашних условиях являются простым и быстрым способом узнать о наличии в организме данной инфекции. На сегодняшний день широко используются специальные наборы для исследования крови, мочи и слюны без обращения к медицинским специалистам.

Главный недостаток экспресс-тестирования заключается в высокой вероятности возникновения ошибок (по сравнению с другими диагностическими методиками). Люди, не имея медицинского образования, могут неправильно использовать или расшифровывать результаты, что способствует получению ложноположительных диагнозов.

Частота подобных ответов во время проведения экспресс-тестирования равна приблизительно 1%. Полученного после первоначального исследования результата для постановки верного диагноза, как правило, недостаточно.

Такое тестирование проводится следующим образом: биологический материал помещают в специальный контейнер, в котором содержится реагент. После этого для получения ответа необходимо 15-20 минут подождать.

Современные портативные устройства выдают 3 варианта: отрицательный, положительный или сомнительный результат.

Последний вариант ответа может наблюдаться в инкубационный период, когда рост и размножение вируса только начинается, поэтому концентрация антител сравнительно невысока. Для постановки диагноза нужно обратиться в специализированную лабораторию.

Как подготовиться к сдаче анализа

Лабораторные исследования по выявлению антител к ВИЧ проводят натощак. Между забором венозной крови и последним приемом пищи должен быть интервал времени не менее 8 часов.

При подготовке к сдаче анализов на ВИЧ нужно соблюдать:

• Специальный питьевой режим. Разрешается только употрeбление негазированной воды. Исключается употрeбление чая, кофе, сахаросодержащих, алкогольных и иных напитков.
• Особый рацион питания, подразумевающий отказ от жирной, жареной и острой пищи за сутки до проведения исследования на ВИЧ.
• Следует избегать стрессовых ситуаций, физического переутомления, травм и употрeбления антибактериальных медикаментозных препаратов.

Если придерживаться вышеперечисленных правил, можно обеспечить максимальную достоверность результатов лабораторного исследования.

Диагностика ВИЧ в лаборатории

Анализы на ВИЧ, проведенные в специальных лабораторных условиях, считаются единственным основанием для подтверждения диагноза. Процедуру проводят открыто или анонимно. Забор крови по времени занимает всего несколько минут.

Читать еще:  Эффективный комплекс упражнений при рассеянном склерозе

Сдавать этот анализ необходимо при любом подозрении на заражение (к примеру, при незащищенном пoлoвoм акте с незнакомым партнером или после применения нестерильного медицинского инструментария).

Виды анализов

При подозрении на ВИЧ проводятся такие исследования:

1. ИФА (иммуноферментный анализ), посредством которого устанавливается наличие антител иммунной системы. Фактически анализ определяет подозрительные и здоровые клетки.
2. Иммуноблоттинг – на присутствие антител изучается сыворотка, которую получают при выделении эритроцитов и плазмы из венозной крови. Это более эффективная и достоверная методика, однако и она не дает 100% точного результата.
3. ПЦР – исследование, позволяющее выявить ДНК вирусов или ее фрагменты. Его преимуществом является выявление вируса на ранних этапах – еще до образования антител. Этот анализ дает большую погрешность, если определяется, заражен человек или нет. Если инфицирование подтверждено, с помощью ПЦР отслеживают динамику изменений при проведении терапии.

Расшифровка результатов

Результаты разных диагностических методов несколько отличаются, однако при выявлении трех основных групп белков врач ставит положительный диагноз.

• Для зараженных ВИЧ людей свойственно наличие лимфоцитоза – высокого количества лимфоцитов. При расшифровке исследования ВИЧ отклонение такого показателя от нормы может наблюдаться в двукратном размере. Норма составляет 25-40% от общего количества лейкоцитов или 1,2-3×109/л в абсолютном числе. При СПИДе развивается лимфопения, которая обусловлена гибелью Т-лимфоцитов.
• Важный показатель при ВИЧ — СОЭ. Для пациентов с данной патологией характерно выраженное увеличение такого значения. Норма у мужчин составляет 1-10 мм/ч, у женщин — 2-15 мм/ч.
• При ВИЧ отмечается понижение гемоглобина, в результате чего у больного развиваются тяжелые формы анемии. Норма у женщин – 120-140 г/л, у мужчин – 130-160 г/л.
• Еще одним характерным показателем для больных с иммунодефицитом является сниженное число тромбоцитов, что может приводить к возникновению кровотечений. Норма составляет — 150-400×109/л у взрослых.

Ложноположительный анализ на ВИЧ при гепатите

Данное заболевание представляет собой воспаление печени в острой или хронической форме. При такой патологии наблюдается некоторое напряженнее иммунной системы, что может объяснять появление ложноположительного результата исследования на ВИЧ. Если гепатит протекает остро, то ошибочный результат практически гарантирован, поскольку в данный период в крови пациента присутствует огромное количество различных антител, которые искажают результат лабораторного анализа. При гепатите, протекающем хронически, исследование проводится во время стойкого периода ремиссии, когда в крови не наблюдается признаков острого воспаления.

Мы рассмотрели, может ли быть анализ на ВИЧ ложноположительным.

Если результат анализа на ВИЧ оказался положительный

ВИЧ-инфекция – заболевание, которое требует своевременной и желательно как можно ранней диагностики. Для этого пациентам, вступавшим в контакт с ВИЧ-положительными людьми, проводят диагностику крови на обнаружение ВИЧ-вируса. Врач проводит дотестовое консультирование, после которого человек получает полную информацию о путях передачи инфекции, ее проявлении, возможных итогах обследования.

Сообщение пациенту итогов тестирования проводится на послетестовом консультировании. Специалист подводит итог обследования и разъясняет прогноз заболевания. Однако положительный результат диагностики на ВИЧ – еще не приговор, так как возможны ошибки при проведении подобного исследования.

Варианты результатов анализа на ВИЧ

Самый распространенный диагностический метод – иммуноферментное исследование (ИФА). Анализ определяет наличие в крови пациента антител к вирусу иммунодефицита. Дополнительный метод называется иммуноблоттингом (иммуноблотом). С его помощью выявляют антитела к отдельным антигенам ВИЧ.

При расшифровке итога анализа ВИЧ врач может получить 4 варианта ответа:

1. ВИЧ-положительный результат означает, что кровь человека содержит антитела к ВИЧ-инфекции. Если после контакта с человеком, инфицированным ВИЧ, прошло от 14 до 60 дней, то в крови будет определяться антиген p24. Он является самым высокоспецифичным из всех чужеродных белков, определяемых тест-системой. Его выявление говорит об инфицировании вирусом иммунодефицита.
2. Отрицательный итог исследования говорит о том, что в крови не обнаружены антитела или чужеродные белковые элементы. Такой ответ не подвергается проверке, если у исследуемого человека в течение последних трех месяцев не было контактов с инфицированным.
3. Ложноположительный результат анализа на ВИЧ – значит, что антитела, синтезирующиеся при некоторых заболеваниях, по своей структуре сходны с антителами к вирусу ВИЧ. Их наличие и показывает анализ. Рекомендуется повторное проведение обследования.
4. Результат исследования на ВИЧ бывает неопределенным, или сомнительным. Данный вывод означает, что при выполнении обследования, возможно, были допущены погрешности. При сомнительном результате проводят иммуноблоттинг через 2 недели после сдачи крови, а затем через 3 и 6 месяцев. Неопределяемый ответ у ВИЧ-положительных людей может быть выявлен из-за ошибки медицинских работников.

Исследование методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) у взрослых пациентов проводят очень редко. ПЦР применяют для определения ВИЧ у новорожденных детей.

Сейчас существуют и экспресс-тесты для диагностики инфекции. Плюс данного метода – полная анонимность. Однако достоверность такой диагностики ставится под сомнение, так как часто выявляются ложноположительные реакции.

Что делать при положительном результате тестирования

Во-первых, необходимо пройти послетестовое консультирование. Врач должен подробно обсудить с пациентом его состояние, прокомментировать все его переживания по этому поводу.

Каждый крупный город имеет свой Центр по борьбе со СПИДом. Туда направляют людей с положительным итогом исследования на вирус иммунодефицита. В Центре обследование проводится повторно методом иммуноблоттинга. При подтверждении диагноза назначается лечение ВИЧ-инфекции антиретровирусными и другими препаратами.

Может ли результат быть ложноположительным после исследования на иммунодефицит методом иммуноблота? Хоть чувствительность и специфичность подобной диагностики высока, есть небольшая вероятность ошибки. При подозрении на ошибку обследование проводится повторно 3 раза. Выявление положительного ответа минимум в двух исследованиях – повод для окончательного выставления диагноза «ВИЧ-инфекция».

В Центрах по борьбе со СПИДом проводятся психологические консультирования. Цель их – изменить отношение пациента к собственной болезни. Психологи объясняют, что ВИЧ- положительные люди, как и все другие, могут создавать семейные пары и рожать детей, жить нормальной жизнью при условии выполнения всех рекомендаций по лечению.

Ложноположительный анализ: причины

Часто ли возникают ошибки при выполнении анализа, выявляющего ВИЧ? Да, при исследовании иммуноферментным методом (ИФА) иногда проявляются ложноположительные результаты. Данный факт может быть следствием врачебной ошибки или зависеть от общего состояния здоровья пациента.

Для получения верного результата нужна подготовка к обследованию. Накануне забора биоматериала нельзя употрeблять в пищу жареные, острые, соленые блюда, алкоголь, газированную воду. Эти продукты могут повлиять на результат диагностики.

Ложноположительный анализ на ВИЧ может иметь следующие причины:

• наличие у исследуемого инфекционных заболеваний (ОРВИ, туберкулез, гепатит, гepпeс, грипп и др.);
• ситуации, когда в крови определяется большое количество иммунных клеток (аутоиммунные заболевания, ревматоидный артрит, состояние после пересадки органов от донора, повышенная температура тела);
• наличие злокачественных новообразований;
• нарушение свертываемости крови, вызванное генетическими заболеваниями;
• заболевания печени, сопровождающиеся повышением уровня билирубина (особенно вызванные длительным приемом алкоголя);
• гормональные сбои у женщин: период менопаузы или предмeнcтpуальный синдром;
• сдача анализа вскоре после прививки;
• длительное донорство компонентов крови.

Ложноположительный итог может возникнуть вследствие неправильного хранения биоматериалов или сывороток для обследования. Причиной получения такого результата может стать неправильный забор крови или нарушения правил её трaнcпортировки.

Если при тестировании на антитела к ВИЧ выявлен ложноположительный итог, необходимо повторить исследование не менее чем через 3 месяца.

Ложноположительный результат у беременных женщин

Обследование беременных женщин на вирус иммунодефицита проводится для исключения возможного заражения плода от ВИЧ-инфицированной матери. Риск передачи ВИЧ будущему ребенку, находящемуся внутриутробно, очень высок. Возможно заражение ребенка и во время родов.

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ у женщин при беременности:

1. В зачатии ребенка участвуют две клетки: мужская и женская. Результатом становится образование новой клетки, имеющей свой набор ДНК. Организм женщины иногда может неадекватно реагировать на появление чужеродного белка, поэтому в нем начинают синтезироваться антитела против зародыша. Особенно часто подобное случается при конфликте крови по резус-фактору. Данные антитела могут ошибочно определяться как антитела к вирусу иммунодефицита, и тогда ответ будет положительным.
2. Инфекционные заболевания или стресс беременной женщины могут создать предпосылки для ложноположительного ответа.

Если у женщины во время беременности получен положительный результат анализа на ВИЧ, не стоит паниковать. Врач обязательно назначит повторное исследование другим методом.